免疫诊断.ppt

　　1张

　　其他占位符： 1

　　标题： 免 疫 诊 断 P241

　　正文： (一)抗原抗体反应的基本原理 1.特异性： 2.可逆性：非共价可逆结合 反应条件：亲和力; 温度、PH、离子浓度 3.可见性：抗原抗体比例适当

　　第一节 抗原或抗体的检测

　　2张

　　其他占位符： 2

　　正文：

　　3张

　　其他占位符： 3

　　正文： (二)抗原或抗体的检测方法： 1.凝集反应： 颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体结合，在有电解质存在时，比例适当，形成肉眼可见的凝集团块。

　　(Gp:) 凝集

　　(Gp:) 沉淀

　　(Gp:) 标记技术

　　4张

　　其他占位符： 4

　　(Gp:) 直接凝集反应

　　正文： (1)直接凝集： 玻片法：定性检测未知抗原 如ABO血型鉴定、细菌鉴定 试管法：定量检测未知抗体 如肥达氏反应

　　5张

　　其他占位符： 5

　　正文： (2)间接凝集：载体颗粒(RBC、乳胶等) 间接凝集：包被已知抗原，如Coombs test 反向间接凝集：包被已知抗体

　　(Gp:) 已知

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　　其他占位符： 6

　　标题： 间接凝集抑制反应：妊娠乳胶试验(HCG)

　　(Gp:) 标本

　　7张

　　其他占位符： 7

　　正文： 2.沉淀反应： 可溶性抗原(血清蛋白、细胞裂解液等)与相应抗体结合后，在有电解质存在时，比例适当，出现肉眼可见的沉淀物。 半固体琼脂凝胶为介质。

　　8张

　　其他占位符： 8

　　正文： 原理: 检测抗原

　　⑴单向免疫扩散：

　　(Gp:) Ab+琼脂

　　(Gp:) 制板

　　(Gp:) 打孔

　　(Gp:) Ag

　　(Gp:) NS

　　(Gp:) Ag

　　(Gp:) Ag

　　(Gp:) 加样

　　(Gp:) 观察

　　(Gp:) (含量)

　　9张

　　其他占位符： 9

　　(Gp:) 沉淀环

　　(Gp:) Ag扩散

　　(Gp:) Ab固定于琼脂

　　(Gp:) 单向免疫扩散

　　10张

　　其他占位符： 10

　　正文： (2)双向免疫扩散：

　　琼脂

　　Ab

　　(Gp:) NS

　　11张

　　其他占位符： 11

　　正文： (3)对流免疫电泳：

　　方法和原理： 双扩+电泳

　　(Gp:) NS

　　(Gp:) Ag

　　(Gp:) Ab

　　12张

　　其他占位符： 12

　　正文： (4)免疫电泳 原理：电泳后双扩

　　应用：血清蛋白种类分析

　　13张

　　其他占位符： 13

　　正文： 3.免疫标记技术： 标记物：荧光素、酶、放射性核素等 特点：敏感性高，定性、定位、定量

　　14张

　　其他占位符： 14

　　正文： (1)免疫荧光法： FITC、PE

　　应用： 检测CD分子;传染病和自身免疫病诊断。

　　15张

　　其他占位符： 15

　　FITC标记

　　16张

　　其他占位符： 16

　　正文： (2)酶免疫测定：HRP、AP *酶免疫组化法： 测定组织中或细胞表面抗原 *酶联免疫吸附试验(ELISA)： 测定可溶性抗原或抗体

　　17张

　　其他占位符： 17

　　正文： ELISA原理： 将已知抗原或抗体吸附于固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面，使抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤液将游离成分洗去。

　　18张

　　其他占位符： 18

　　正文： 方法： *双抗体夹心法： 检测抗原

　　(Gp:) Ag

　　(Gp:) 底物

　　包被

　　标本

　　洗涤

　　(Gp:) 酶标抗体

　　19张

　　其他占位符： 19

　　正文： *间接法： 检测抗体

　　(Gp:) 洗涤

　　(Gp:) 洗涤

　　(Gp:) 洗涤

　　(Gp:) 标本

　　(Gp:) 观察结果

　　20张

　　其他占位符： 20

　　*生物素-亲和素系统(BAS)ELISA： 生物素标记抗体，酶标记亲和素

　　*抗原竞争抑制法：

　　(Gp:) 标本

　　21张

　　其他占位符： 21

　　正文： (3)放射免疫测定法(RIA)： 131I、125I标记，微量物质测定

　　或放射 自显影

　　22张

　　其他占位符： 22

　　(4)免疫印迹Western Blot

　　(Gp:) 覆盖转印→硝酸纤维素膜

　　(Gp:) (去垢剂)

　　(Gp:) 将分子大小不同的蛋白质分开

　　(Gp:) 41 24

　　(Gp:) 120

　　23张

　　其他占位符： 23

　　(Gp:) 稀释的抗凝血

　　(Gp:) 淋巴细 胞分离液

　　(Gp:) 淋巴细胞分离液

　　标题： 第二节 淋巴细胞的测定

　　正文： 外周血单个核细胞(PBMC)分离： 密度梯度分离法

　　(Gp:) 血浆 血小板

　　(Gp:) PBMC

　　(Gp:) 红细胞 粒细胞

　　(Gp:) 单核细胞

　　(Gp:) 淋巴细胞90%

　　24张

　　其他占位符： 24

　　正文： 淋巴细胞亚群的分离与鉴定： 尼龙毛分离法： E花结实验：

　　(Gp:) CD2/LFA-2

　　25张

　　其他占位符： 25

　　利用表面标志分离淋巴细胞亚群

　　(Gp:) 免疫荧光

　　26张

　　其他占位符： 26

　　正文： 流式细胞术：

　　(Gp:) 样品进入孔

　　(Gp:) 待分离单细胞悬液 +荧光标记抗体

　　(Gp:) 产生散射光

　　(Gp:) 光电倍增管

　　(Gp:) 发射荧光

　　(Gp:) 根据细胞表面电荷

　　27张

　　其他占位符： 27

　　正文： Lc功能测定： 1.淋巴细胞增殖/转化试验： 原理： 有丝分裂原等非特异刺激T、B细胞向淋巴母细胞转化、增殖。 方法： MTT法：

　　(Gp:) 线粒体琥珀脱氢酶

　　(Gp:) MTT (噻唑盐)

　　(Gp:) 甲臜颗粒 (紫蓝色)

　　28张

　　其他占位符： 28

　　(Gp:) 氚标记的胸腺嘧啶核苷

　　(Gp:) 放射能

　　(Gp:) 丝裂原

　　淋巴细胞增殖实验

　　3H-TdR掺入法

　　MTT

　　用酶标仪 测定细胞 培养OD值

　　29张

　　其他占位符： 29

　　正文： 2. T细胞介导的细胞毒试验：CTL

　　(Gp:) 待检

　　(Gp:) 杀伤 靶细胞

　　(Gp:) 标记

　　30张

　　其他占位符： 30

　　正文： 3. B细胞溶血空斑实验：

　　(Gp:) RBC表面Ag

　　(Gp:) Ab

　　溶血空斑

　　(Gp:) 补体

　　(Gp:) 1～3小时

　　检测：B细胞的抗体产生功能

　　31张

　　其他占位符： 31

　　溶血空斑

　　溶血空斑实验

　　32张

　　其他占位符： 32

　　标题： 免 疫 预 防

　　正文： 特异性免疫的获得方式： 1.自然免疫： 2.人工免疫：主动、被动免疫

　　(Gp:) 自然主动免疫

　　(Gp:) 自然被动免疫

　　33张

　　其他占位符： 33

　　标题： 一、人工主动免疫

　　正文： 概念： 用具有免疫原性的物质接种机体，使之产生特异性免疫，从而预防感染的措施。 疫苗 (一)传统疫苗： 1.灭活疫苗(死疫苗)： 2.减毒活疫苗： 3.类毒素：

　　34张

　　其他占位符： 34

　　标题： 灭活疫苗和减毒活疫苗的特性比较

　　35张

　　其他占位符： 35

　　正文： (二)新型疫苗： 1.亚单位疫苗：保留有效免疫原成分 2.结合疫苗：TI-Ag+载体→TD-Ag 3.合成肽疫苗： 4.基因工程疫苗： 重组抗原疫苗： 重组载体疫苗： DNA疫苗: 转基因植物疫苗：

　　编码有效免疫原的基因

　　36张

　　其他占位符： 36

　　标题： 二、人工被动免疫

　　正文： 概念： 给人体注射含有特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂，以治疗或紧急预防感染的措施。 常用制剂： (一)动物免疫血清:

　　外毒素

　　抗毒素

　　(Gp:) 类毒素

　　(Gp:) 脱毒

　　(Gp:) 刺激

　　(Gp:) 中和

　　(Gp:) 刺激

　　37张

　　其他占位符： 37

　　正文： (二)人免疫球蛋白制剂 1.丙种球蛋白： 紧急预防甲肝、麻疹、脊髓灰质炎 2.人特异性免疫球蛋白： 如抗乙肝病毒免疫球蛋白 (三)细胞因子制剂：IL-2、IFN等 (四)单克隆抗体制剂：

　　(Gp:) 人血清丙种球蛋白

　　(Gp:) 胎盘丙种球蛋白

　　(Gp:) 恢复期病人血清

　　(Gp:) 免疫志愿者的血清

　　38张

　　其他占位符： 38

　　正文：

　　39张

　　其他占位符： 39

　　标题： 免疫治疗

　　正文： 免疫增强疗法： 免疫抑制疗法： 特异性免疫治疗： 非特异性免疫治疗： 主动免疫治疗： 被动免疫治疗：

　　40张

　　其他占位符： 40

　　正文： (一)抗原类制剂：疫苗、瘤苗、自身抗原 (二)抗体类制剂 1.免疫血清： 2.抗淋巴细胞丙种球蛋白： 3.抗肿瘤抗体制剂：靶向治疗 常用细胞毒物质：放射性核素、化疗药物、毒素 存在问题： 鼠源性抗体;对实体肿瘤穿透力差;特异性不高。 4.抗细胞因子抗体：如用抗IL-1治疗RA。

　　41张

　　其他占位符： 41

　　正文： (三)免疫细胞类制剂： 1.造血干细胞移植：骨髓移植、脐血转输 2.过继免疫疗法： CIK：cytokine induces killer cells.细胞因子诱导的杀伤细胞。主要源于NK(外周血淋巴细胞)。 TIL：tumor infiltrating lymphocytes,肿瘤浸润性淋巴细胞。源于实体瘤组织，更强的杀伤活性。

　　42张

　　其他占位符： 42

　　正文： (四)生物应答调节剂： BRM，具有促进或调节免疫功能的制剂，通常对免疫功能正常者无影响，对免疫功能异常尤其是免疫功能低下者有促进和调节作用。 1.BCG、短小棒杆菌、细菌或真菌的多糖成分 2.胸腺肽： 3.转移因子： 4.免疫核糖核酸：

　　43张

　　其他占位符： 43

　　正文： (五)免疫抑制剂： 化学合成：环磷酰胺，硫唑嘌呤 微生物制剂： 环孢素或环孢菌素CsA;FK-506;雷公藤制剂

　　44张

　　其他占位符： 44

　　抗原

　　补体

　　免疫细胞

　　MHC

　　CK、CD等

　　抗体

　　免疫应答

　　B细胞

　　T细胞

　　(Gp:) 体液免疫

　　(Gp:) 细胞免疫

　　复 习:

　　生理：

　　病理的免疫应答：

　　超敏、肿瘤、移植免疫

　　诊断、防治：

　　APC

　　45张

　　(Gp:) APC

　　(Gp:) T细胞

　　(Gp:) LFA-1

　　(Gp:) CD2

　　(Gp:) LFA-3

　　(Gp:) TCR

　　(Gp:) CD28

　　(Gp:) B7

　　(Gp:) CD4

　　(Gp:) MHC-Ⅱ

　　肽

　　(Gp:) CD40L

　　(Gp:) CD40

　　(Gp:) ICAM-1

　　1

　　2

　　2

　　46张

　　其他占位符： 46

　　正文： 作用：以IgG为代表:

　　结合抗原的部位

　　遗传标记所在部位

　　结合补体、结合胎盘部位

　　结合细胞部位