霍乱病毒.ppt
1615251280解决。
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标题： 霍乱病毒
正文： xxx
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标题： 概述
正文： 霍乱是由霍乱弧菌所致的烈性传染病。发病急、传播快，是亚洲、非洲大部分地区腹泻的主要原因。 临床表现轻重不一，大多数病人仅有轻度腹泻，少数重者可有剧烈吐泻、脱水、肌肉痉挛及周围循环衰竭，甚至肾功能衰竭等。
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标题： -历史
正文： 从1817至1923年百余年里共发生6次世界性大流行，每次大流行我国都遭到侵袭。 1905年在埃及西奈半岛首次分离到埃尔托生物型霍乱弧菌。自1961年起至今，已蔓延到全世界，称为霍乱的第7次世界性大流行，至今尚未停熄。
【流行病学】
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标题： (一)霍乱流行史
正文： 1992年10月，印度发生霍乱暴发，并迅速波及孟加拉部分地区。研究证明，这次大流行是由非0l群的一个新血清型—0139霍乱弧菌所引起的。 这次霍乱暴发流行仍在继续扩散蔓延，1993年4—6月间已波及我国。如果流行将造成霍乱的第8次世界性大流行。
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标题： (一)霍乱流行史
正文： 经采取积极防治措施，霍乱疫情在我国逐年下降。如1993年全国共发生11717例，死亡142例。
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标题： (二)流行环节
正文： 1.传染源 病人在发病期间，可连续排菌，时间一般为5--14日，尤其是中、重型病人，排菌量较大(含菌107—109)，污染面广泛，是重要的传染源。 轻型病人、健康带菌者也是重要传染源。
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2.传播途径
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标题： (二)流行环节
正文： 3.人群易感性 一般人群均普遍易感，患霍乱后可获一定程度的免疫力，但不持久。 胃酸具有强力的杀弧菌作用。本病隐性感染发生多，据报告由埃尔托弧菌所致者，隐性感染占75%，而显性感染仅占25%，其中重型约占2%。
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标题： (三)流行特点
正文： 1.地方性与外来性 印度恒河三角洲是世界古典型霍乱的地方性疫源地，是六次世界性古典型霍乱大流行的发源地。印度尼西亚的苏拉威西岛是埃尔托型霍乱的地方性疫源地。 由于国际交往和旅游的频繁，可使本病从一国传 至另一国，这种外来性的传播，会造成当地暴发流行。
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标题： (三)流行特点
正文： 2.季节性与周期性 热带地区全年均可发病。我国仍以夏秋季为流行季节，高峰期在7—8月间。无明显周期性流行。沿海地区发病较多
3. O139流行特征： 疫情来势凶猛，传播快，散发为主。经水和食物传播，人群普遍易感，与O1群无交叉免疫。
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标题： (三)流行特点
正文： 3. O139流行特征： 来势猛，传播快，散发，无家庭聚集现象 经水与食物传播，人群普遍易感 与Ol群及非Ol群其他弧菌感染无交叉免疫力 地区分布先沿海，后内陆，与埃尔托型霍乱相一致 病人与带菌者为传染源
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标题： 霍乱病源学
正文： (一)弧菌的分类 (二)形态、染色 (三)培养特性 (四)生化特性 (五)抗原性 (六)致病性 (七)变异 (八)对抗菌素敏感性 (九)存活力
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标题： 【病原学】弧菌的分类
正文： 1 弧菌科(五个属) 弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 发光杆菌属和水栖菌属 弧菌属(30多个种) 对人有致病性：(12种) 霍乱弧菌 副溶血弧菌 河弧菌 拟态弧菌 麦氏弧菌 霍利斯弧菌 溶澡弧菌 弗尼斯弧菌 创伤弧菌 海鱼 弧菌 辛辛那提弧菌 鲨鱼弧菌
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标题： 【病原学】弧菌的分类
正文： 2、霍乱弧菌 霍乱弧菌根据菌体抗原分200多个群，O1、O139有相同毒素基因 对人类有致病性:O1群、O139群霍乱弧菌。国际检疫传染病----霍乱的病原学诊断是以检出O1或O139群为主 . O1群霍乱弧菌：古典生物型 埃尔托生物型 埃尔托生物型：流行株 非流行株
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标题： (一)形态
正文： 霍乱弧菌,为G-，短小稍弯曲的杆菌。无芽胞，无荚膜，长1.5—3μm，宽0.3—0.4μm,菌体末端有一根鞭毛，运动活泼O139型可见荚膜。
【病原学】
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标题： (三 )培养
正文： 霍乱弧菌属兼性厌氧菌，培养以37℃为最适宜，先在碱性(pH8.4—9.0)肉汤或蛋白胨水中增菌，分离时采用碱性琼脂平板培养基，可见菌落光滑、较大、扁、无色，似水滴状。
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标题： (三)培养特性
其他占位符： 1???O1群与O139群菌株培养生长情况相似，繁殖速度快，好氧，16—42℃生长，37℃最适，2—3小时形成菌膜，6—8小时分离。 2??可繁殖PH6.0---9.2 最适7.2---7.4 , 初分送样培养基PH8.4—8.6。 3 庆大琼脂呈无色半透明，中心灰黑点，常用选择培养基含胆盐、亚碲酸钾、十二烷基磺酸钠等。
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标题： (三 )抗原结构和分类
正文： 霍乱弧菌H抗原相同，而O抗原不同。 霍乱弧菌O抗原特异性高，有群或型特异性两种抗原。
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正文： O1群霍乱弧菌型的特异性抗原有A、B、C三种，其中A为O1群弧菌所共有，是群特异性抗原，而B、C为型特异性抗原。
小川型
稻叶型
彦岛型
小川型
稻叶型
彦岛型
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正文： ①O1群霍乱弧菌∶包括古典生物型和埃尔托生物型; ②不典型O1群霍乱弧菌∶无致病性，不产生肠毒素; ③非O1群霍乱弧菌∶92年新发现O139血清型霍乱弧菌，可产生肠毒素，列为国际检疫病原。
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标题： (四)生化特性(1)
正文： 1糖发酵：霍乱分解葡、麦、甘(糖、醇)、蔗、半乳、左旋、湖、淀粉产酸不产气。还分解乳糖，不分解阿拉伯胶糖、卫茅糖、水杨素、木胶糖、肌醇和侧金盏花醇。 2 靛基质：O1群两生物型和O139群均分解色氨酸产生靛基质。 3 霍乱红：O1群两生物型和O139群均能还原硝酸盐为亚硝酸盐，呈阳性反应，但外环境的O1群菌呈阴性反应，故已不作鉴定霍乱弧菌项目之一。
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标题： (四)生化特性(2)
其他占位符： 5? V---P：多数O139群和El—Tor弧菌呈阳性，古典型呈阴性。 6 溶血性：古典与O139群不溶血，El—Tor菌已由溶血变为不溶血，所以溶血性只在E1-Tor型内有一定意义。 7? 氧化酶和粘丝试验：弧菌属除麦氏产气外氧化酶均阳性;除副溶血外粘丝均为阳性，在弧菌菌落鉴定有意义。 8 弧菌抑制剂：O/129(二氨基二异丙基喋啶)敏感试验：O1群90%以上菌株对10ug/ml O/129敏感，O139多不敏感。
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标题： (五)抗原性
正文： 耐热性的菌体抗原(O) O抗原特异性高：分群和分型的基础 群特异性抗原 型特异性抗原 不耐热的鞭毛抗原(H) H抗原为霍乱弧菌所共有
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标题： WHO分类
正文： O1群霍乱弧菌：霍乱的主要致病菌 两个生物型： 古典生物型(classical biotype) 埃尔托生物型(EL—Tor biotype) 三个血清型：小川型;稻叶型;彦岛型 不典型 O1群霍乱弧菌：无致病性 非 O1群霍乱弧菌：O139血清型霍乱弧菌
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标题： (五)抗原性
正文： 1?O1与非O1群均有耐热O抗原和不耐热H抗原，H抗原相同。 2 根据O抗原目前已分出200多个O血清群。 3?O1与O139群霍乱菌的鉴定是以“O”血清即O1和O139群诊断血清凝集为主要依据。 4 O1群据O抗原不同分为小川、稻叶和彦岛3个血清型。 5?A群抗原，B、C型抗原，小川型为B因子，稻叶为C因子 。 6 O139群菌因不与O1群血清(A、B、C)因子发生凝集，但除凝集本菌能使O22群、O155群及O1群粗糙型发生交叉凝集。
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标题： (六)致病性
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标题： (一)发病机制
正文： 霍乱弧菌未被胃酸杀灭时，则可进入小肠并保持其活力。在小肠的碱性环境中，其粘附于肠粘膜表面，迅速大量繁殖(一般致病菌量为107—108/ml肠液)。
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标题： 发病机制
正文： 霍乱弧菌 小肠 TCPA(毒素协同调节菌毛A) 粘附于小肠上段粘膜上皮细胞的刷状缘 大量繁殖，并产生霍乱毒素(Choleragen) 细胞内cAMP浓度持续升高 杯状细胞 隐窝细胞分泌，抑制绒毛细胞吸收 粘液微粒 引起严重水样腹泻 米泔状大便
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标题： 霍乱肠毒素
霍乱肠毒素(也称霍乱原，choleragen)在发病机制中起关键作用。
Figure The bacterium produces a toxin that is the cause of the cholera. The toxin molecule is composed of several parts, one of which (coloured blue) penetrates the cell membrane (yellow)
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标题： 霍乱肠毒素 (enterotoxin)
正文： 三型霍乱弧菌均能产生肠毒素(CT)。CT是一种极强活性的蛋白质毒素，是致病的主要因素。CT分子量为8.4kDa，不耐热，56度30分钟即破坏，有抗原性。 霍乱弧菌还能产生神经氨酸酶、血凝素及内毒素。
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标题： 霍乱肠毒素引起小肠过度分泌的机制
正文： 霍乱肠毒素由1个A亚单位和5个B亚单位组成 B亚单位与肠黏膜上皮细胞的受体GM1结合
(Gp:) (B) Binding of B subunits to oligosaccharide of GM1 ganglioside.
(Gp:) (A) Cholera toxin approaching target cell surface.
(Gp:) (C) Conformational alteration of holotoxin presenting A subunit (black) to cell surface.
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标题： 霍乱肠毒素引起小肠过度分泌的机制
正文： G蛋白的ADP-ribose化抑制其GTP酶活性 AC持续活化，ATP不断转变为cAMP 刺激隐窝细胞分泌水、氯化物及碳酸氢盐。
(Gp:) 第二信使
(G) ADP-ribosylation of G protein, inhibiting action of GTPase and “locking” adenylate cyclase in “on” mode.
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标题： (一)发病机制
正文： 当细胞内cAMP浓度升高时，即发挥了第二信使作用，刺激隐窝细胞分泌水、氯化物及碳酸氢盐功能增强，同时抑制绒毛细胞对钠的正常吸收，以致出现大量水分与电解质聚积在肠腔，形成本病特征性的剧烈水样腹泻。 霍乱毒素作用于肠道杯状细胞，使大量粘液微粒出现于粪便中，加之胆汁分泌减少，形成米泔水样大便。
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标题： (二)病理生理
正文： 霍乱剧烈的呕吐和腹泻，易发生水与电解质的紊乱。
钠 钾 氯化物 碳酸氢盐 病人粪便：成 135 15 100 45 儿 105 25 90 正常血浆: 136 3.8 98 24 ～148 ～5.0 ～106 ～32
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标题： (七)变异
其他占位符： 1 菌体形态:弧型→直杆 2?粗糙型：菌落与光滑型相似，略干，脆些;皱折型与L型，可恢复正常。 3?溶血性：El—Tor菌溶血与不溶血可相互转化。 4??血清型：O1群在人体、动物体内及人工传代均发生血清型转变。 5?基因型：El—Tor和O139群不断出现新的克隆，CT产生受染色体控制，已从自然界检出ctx A B缺失的突变株。
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标题： (八)对抗菌素敏感性
其他占位符： 1? O1与O139群菌株对抗菌素敏感性基本相似。 2 抗药性:古典生物型比El—Tor生物型更敏感. 3 细菌耐药是与耐药质粒传递有关，古典型能检出质粒，El—Tor则很少，O139不明，所以霍乱耐药性获得待研究。
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标题： (九)抵抗力
正文： 霍乱弧菌在外环境中存活力是很有限的，但埃尔托比古典型有较强的抵抗力。 在pH8.2的江水中，埃尔托型存活16天，而古典型只生存2天。一般在未经处理的河水、塘水、井水及海水中，埃尔托型可存活1—3周，在鲜鱼、鲜肉和贝壳类食品上的弧菌可存活1—2周，在蔬菜、水果上可存活1周左右。 O139对外界的适应能力更强。
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标题： (九)抵抗力
正文： 霍乱弧菌对热、干燥、直射日光、酸及一般消毒剂均甚敏感。 干燥2小时或加热55℃10分钟弧菌即可死亡，煮沸后立即被杀死。 在常用消毒剂如高锰酸钾、漂白粉5～10min即可杀死，直接接触过氧乙酸溶液即刻死亡。 在正常胃酸中霍乱弧菌能生存4分钟
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标题： 三 、 检验诊断
正文： 及时发现传染病和确定疫情，对扑灭霍乱极为重要。病人早期诊断靠临床、流行病学和迅速准确的检验诊断，特别是轻型患者、带菌者，检验诊断十分重要。
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标题： 实验室检验
其他占位符： 霍乱的检验诊断是从检材中分离病原体。方法是将病人标本在选择性培养基上进行直接分离或经过增菌后再做分离。对检出的可疑菌落，以血清学特性为主，结合形态学和生化学性状进行鉴定。根据流行病学调查需要，进行霍乱弧菌的生物型、血清型和噬菌体—生物分型的检查，必要时进行毒力试验和药敏试验等
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标题： O1群与O139群霍乱弧菌的检验程序
第二次 增菌 (碱胨水)
增菌培养 (碱胨水)
标本(粪便等)
快速诊断
分离培养 (庆大霉素琼脂等)
初步报告
玻片凝集阳性 结合菌落、菌体形态 凝集菌落或可疑菌落
纯培养 (普通琼脂)
鉴定分型
确诊报告
10—20小时
10—20小时
6—8小时
直
接
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标题： 标本的采集和送检
其他占位符： (1)标本以病人粪便为主，争取在发病早期、服用抗菌药物之前。 (2)成形便指甲大小，水样1—3ml 。 (3)立即送检或保存碱性胨水中，标本与保存液比例为1—3ml：8—10ml。 (4)标本送检单写明姓名、地址、发病时间、采集时间、临床诊断等，标本妥善包装置坚固箱内，安全送检与消毒。
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标题： (一)血液检查
正文： 血液浓缩，使红细胞压积和血浆比重升高。RBC可达6.0×l09/L，WBC也可增至10一30×l09/L，分类中可见中性粒细胞及大单核细胞增多。血清钾、钠在疾病初期多数在正常范围，经输液后普遍降低，尿素氮增加。
【实验室检查】
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标题： (二)尿液检查
正文： 少数可见红、白细胞、蛋白及管型。
【实验室检查】
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标题： (三)粪便检查
正文： 1.常规检查 米泔样或洗肉水样，无粪臭，稍有鱼腥味，镜检无脓细胞，可见粘液，和少数红、白细胞。
【实验室检查】
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标题： 2.细菌学检查
正文： (1)粪便直接检查： ①涂片染色，能见到排列呈鱼群状的革兰阴性弧菌。 ②悬滴镜检，可见到运动力强，呈穿梭状快速运动的细菌。 ③制动试验，能被特异性抗血清所抑制。 ④应用荧光抗体检测粪便中弧菌。
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【实验室检查】
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标题： 粪便检查
正文： (2)粪便培养：将粪便标本直接接种于碱性蛋白胨水增菌后，于碱性琼脂培养基上作分离培养。 根据多价诊断血清和多种试验鉴别古典或埃尔托生物型，或O139型。也可应用DNA探针作菌落杂交鉴定产毒素Ol群霍乱弧菌。
【实验室检查】
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标题： 分离培养方法
其他占位符： (1)对急性期病人便标本在增菌同时作直接分离，缩短时间，提高检出率，其他标本均需增菌，含菌量少的要增2次。 (2)碱性胨水6—8小时后分离到庆大琼脂(夏季运送时间计在内)。 (3)一个标本分离一个平皿，培养基表面烘干，分出尽可能多的单个菌落。 (4)庆大琼脂培养4—5小时，有菌落生长，8—10小时长出菌落。
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标题： 快速辅助诊断
其他占位符： (1)制动试验：取急性期病人水样便1滴于玻片镜检(暗视野、相差镜)，见流量运动加1滴O1或O139免疫血清，运动停止，凝集成块。血清不含防腐剂1：64 (1：1280 稀释20倍)。 (2)早期玻片凝集法：O1、O139在庆大琼脂生长快，8—10小时可取菌落作玻片凝集，阳性者初步报告。 (3)PCR法：用适当引物检测El—Tor和O139群霍乱CT基因可获得一条分子量为308bp的扩增片段，检测下限为5个菌体。
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标题： (三)霍乱弧菌的鉴定和分型
其他占位符： 鉴定标准的人血清学性状为主，结合形态学和生化学性状作出判断，血清学性状以玻片凝集试验为主，可疑菌落先用O1群，再用O139群霍乱弧菌诊断血清作检查。如与O1群诊断血清凝集，再同分型血清区分血清型别。试管凝集仅在特殊时进行。作为辅助鉴定，形态学上可做革兰氏染色，观察形态，检查动力;生化学上辅以氧化酶试验和粘丝试验即可。必要时再做其他试验，以便与类似细菌作鉴别。此外还要做霍乱古典和El—Tor型的鉴别，以及噬菌体—生物分型
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标题： 1 玻片凝集试验
其他占位符： (1)可疑菌落分别与O1与O139群血清做玻片凝集试验，如有O1与O139两价混合血清，先用两价再用单价鉴定。 (2)玻片凝集效价一般应为1：40—1：50(不低于1：32，不高于1：64)，如原效价1：1280，制成1：50(1280*1/50=25.6倍)。 (3)以生理盐水对照，取5个以上菌落逐个进行，10秒左右出现肉眼可见凝集为阳性。 (4)恢复期病人的典型菌落不凝集时，应用L型血清作凝集。
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标题： 2 血清分型和试管凝集试验
其他占位符： (1)血清分型 ①O1群霍乱弧菌的血清分型具有流行病学意义。 ②O1群分为小川、稻叶和彦岛型，O139群不分型。 (2)试管凝集 对流行首批病例菌株和进一步鉴定的特殊菌株(凝集不好，两型单价血清均良好凝集)，进一步试管凝集。
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标题： 3 形态学和生化学检查：
其他占位符： ①??革兰氏染色检查为Gˉ菌。 ②?普通半固体穿刺，37℃18—20小时，O1与O139均沿线扩散生长，培养基混浊。 ③ O1与O139群菌株氧化酶、粘丝和靛基质试验均阳性。
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标题： 4.鉴别诊断：
正文： 1.细菌性食物中毒：其特点为：有不洁食物史，同餐者往往集体发病。常有先吐后泻，排便前可有剧烈腹痛。粪便呈黄水样，较臭，偶有粘液或脓血便。可有发热及中毒症状，但循环衰竭少见。 2.急性细菌性痢疾 临床上常见有发热，大便为粘液、脓血便，量少，有腹痛及里急后重。大便镜检有大量脓细胞，培养可获痢疾杆菌。
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标题： 4.鉴别诊断：
正文： 3.大肠杆菌性肠炎 主要与产肠毒素性大肠杆菌或致病性大肠杆菌引起的肠炎相鉴别。本症常有发热，恶心呕吐，剧烈腹部绞痛。大便每日l0数次，黄水或清水样便。严重者亦可出现脱水，婴幼儿患者可因此而危及生命。
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标题： 5 O1群古典与El—Tor型鉴别
其他占位符： El—Tor弧菌已转为不溶血，溶血试验不能区别两生物型，主要靠第Ⅳ组霍乱噬菌体常规稀释液(106/ml)裂解来鉴别。同时辅以多粘菌素B、鸡血球凝集、V—P和溶血试验以供参考。
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标题： O1群霍乱弧菌两个生物型鉴别
正文： 鉴别试验 O1 群 霍 乱 弧 菌 古典型 埃尔托 1 第Ⅳ组霍乱噬菌体(106/ml) + -(+) 2 多粘菌素B敏感试验 + -(+) 3 鸡血球凝集试验 -(+) +(-) 4 V—P试验 - +(-) 5 溶血试验 - + -
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(1) 第Ⅳ组霍乱噬菌体裂解试验：常规稀释液106/ml)，只裂解古典型，而不裂解埃尔托型，其原液(109/ml)对古典、埃尔托两型均裂解。对古典型裂解为增殖性裂解，对埃尔托为外因裂解(致死)。本试验与噬菌体—生物型同一平皿进行。
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(2)多粘菌素B敏感试验： A 将1.5%普通琼脂熔化冷却至50℃左右，按每毫升培养基加入50单位多粘菌素B倾注平板备用。 B 平皿背后划若干方格，被检菌2—3小时培养物用接种环接种琼脂表面格内，9cm平皿可接16—20个菌株。 C 37℃培养过夜观察，古典型不生长、生长不足(敏感)10个菌落，El—Tor和O139不敏感，长出菌苔。 D 本试验可用多粘菌素B纸片(50单位)按药敏常规法进行。
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(3)鸡血球凝集试验 A 平皿内划出方格，每格1滴生理盐水，取被检菌18小时琼脂培养物少许在生理盐水中制浓菌液。 B 用接种环各加1滴经3次洗涤的2.5%鸡血球生理盐水悬液，肉眼观察结果，1分钟内出现凝集为阳性，El—Tor为阳性，古典型为阴性。
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(4) V—P 试验： A 被检菌接种于葡萄糖磷酸盐胨水37℃培养2-3天。 B 取1ml培养物加5% α—萘酚乙醇溶液0.6ml，振荡5分钟加入40%KOH0.2ml,再振5分钟，去棉塞放室温。 C 一般2—5分钟出现浅红色，以1h内出现红色为阳性，古典型为阴性，埃尔托和O139为阳性 。
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标题： 6埃尔托弧菌噬菌体—生物分型
其他占位符： 为区分埃尔托型的(流行株与非流行株)两类菌株，作为追溯传染源，传播途径和分析流行形式的工具。
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标题： (1) 噬菌体分型
其他占位符： A 根据国内5株噬菌体(VP1—VP5)将El—Tor弧菌分成32个噬菌体型，其中1型为常见流行株，2型为1型的粗糙型，3—6型也属流行株 B 方法 a 将1.5%普通琼脂平皿背面划出9个方格，再将被检菌2—3小时肉眼培养物0.2ml加至熔化并冷却至50℃半固体琼脂(0.7%4ml)中，倾注平皿琼脂上。 b 于第1—5格滴加VP1---VP5噬菌体原液(108—109/ml)，第6、7格滴加第Ⅳ组霍乱噬菌体原液及常规稀释液，第8、9格滴加El—Tor弧菌的溶原噬菌体两个代表株，对溶原性噬菌体敏感性的测定。 c 干后37℃过夜观察结果，裂解者为阳性。
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标题： (2) 生物分型
其他占位符： ①根据菌株的溶原性，对溶原噬菌体的敏感性，山梨醇发酵试验和溶血试验4个生物学性状，将埃尔托弧菌分12个生物型。a—f 型为流行株，g—l型为非流行株。流行株中a—d型常见，非流行株K、l居多。a、b、g、h型为溶原株，c、d、I、j为复愈株，e、f、k、l为非溶原株。
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②方法 A 溶原性测定：El—Tor弧菌溶原性菌株在繁殖过程中，自发释放噬菌体，可用16141SM6(El—Tor复愈型抗链霉素株)作指示菌测定。 用双层琼脂法制备指示菌平皿：a：9cm平皿倾注1.5%普通琼脂培养基，平皿底背面划16—20个方格，注被检菌号。b：将0.7%普通半固体琼脂培养基4ML，熔化冷至50℃加入指示菌的8—12h肉汤培养基0.3ml和链霉素2000单位，倾注上述琼脂平皿表面。c：被检菌18—24h肉汤培养物用接种环滴加在指示菌平皿每一小格中，置于37℃过夜，出现不透明磨玻璃样噬斑或裂解区为阳性。
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B 对溶原噬菌体敏感性测定：在噬菌体分型的9格双层琼脂平皿的第8、9格El—Tor溶原噬菌体代表株(溶原性细菌的18—20h肉汤培养物，经56℃30分钟灭活使用)培养过夜后，出现不透明噬斑为阳性，表示被检菌对溶原噬菌体敏感，即为复愈株，否则为溶原株或非溶复株。 C：山梨醇发酵试验：被检菌2—3h肉汤培养物0.1ml接种山梨醇发酵管(PH8.0)37℃3小时观察结果，El—Tor菌流行株和O139群发酵迟缓，非流行株及不产毒的O139发酵快，使用PH8.0山梨醇时，培养时间4—5h。 D：溶血试验：取被检菌24h肉汤培养物1ml，1%绵羊红血球(洗3次，最后1次为2000r/min离心10分钟)1ml混合后37℃2h观察初步结果，再放4℃冰箱过夜观察最后结果，应设对照，半数血球溶解者为阳性，O139为阴性。 上述噬菌体分型和生物分型试验：使用两皿(噬菌体分型皿和溶原性测定皿)和两管(山梨醇和溶血试验管)来完成。
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标题： (3)埃尔托型菌噬菌体—生物分型
其他占位符： 将上述噬菌体与生物分型结合起来，区分流行与非流行菌株，噬菌体1—6型、生物型a---f型为流行株，常见为1—3型、生物型为a—d型，最常见的是1a、1b和1d型。 1998年我国在小川1b流行区出现小川6b型，CT基因检测证明与小川1b株相同。
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标题： ?? 7 O1群与O139群霍乱弧菌的鉴别：
其他占位符： (1)???O139群与O1群均为G-，无芽孢短小稍弯曲杆菌，单端一根鞭毛，运动活泼。 (2)???O139群菌体表面有多糖荚膜，其抗原性与O1群相同。 (3)???O139群与O1群生化特性基本相同，但O139对弧菌抑制剂(O/129)具有抗性(10μg或150μg)。 (4)??? O139群与O1群有相同的鞭毛抗原，但O 抗原不同，无交叉。
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标题： 8 血清学诊断：
其他占位符： 霍乱病后血清中出现抗菌抗体(凝集素，杀弧菌抗体)和抗毒抗体。 1??抗菌抗体发病3—5天出现，8—21天高峰(多为10—15天)，11—12天开始下降。 2??常用凝集和杀弧菌试验检测抗菌抗体，具有相关性，但杀弧菌试验更敏感，滴度高，有非特异性反应。 3??血清学有助于流行病学追溯诊断，采用病人双份血清(1—3天)和(15—20天)，滴度升高4倍或以上有诊断意义。
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标题： 血清学检查
正文： 霍乱病后不久，可在血清中出现抗菌的凝集素、杀弧菌抗体及抗毒抗体。临床血清学检测常用凝集试验和杀弧菌试验，双份血清抗体效价4倍以上增长，即有追溯性诊断意义。
【实验室检查】
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标题： (一)诊断标准：
正文： 下列3项中有1项阳性者，即可确诊： 1. 凡有泻吐症状，粪便培养阳性者。 2.流行区内，凡有典型临床表现，而粪便培养阴性，而无其他原因可解释者。经血清抗体测定呈4倍以上增长，可确定诊断。 3. 在流行病学调查中，粪便培养阳性，此人在粪检时可无不适，但检前5天或检后5天内有腹泻症状者及接触史，可诊断为轻型霍乱。
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标题： (二)疑似诊断
正文： 下列2项中有1项阳性者，即可为疑似诊断： 1.有典型症状，但病原学检查未确定者。 2.流行期间，有明显接触史，且有泻吐症状，而无其他原因可查者，但病原检查尚未确定。 凡疑似病例应填疑似报告、隔离、消毒。并每日作粪培养，如三次阴性，可否定诊断并作更正报告。
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标题：
The end 2015.6