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细菌感染的非培养检测方法.ppt

细菌感染的非培养检测方法.ppt
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细菌感染的非培养检测方法.ppt

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  标题: 细菌感染的非培养检测方法

  副标题: xxx医院检验科

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  标题: 主要方法

  正文: 免疫学检测 分子生物学检测 细菌毒素检测 动物实验

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  标题: 免疫学检测

  正文: Ag+Ab AgAb 用已知抗体或抗原来检测未知抗原抗体

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  标题: 抗体检测

  正文: 已知抗体检测未知抗原:效价(或滴度)的升高 诊断血清 多价血清 单价血清 因子血清

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  标题: 抗原检测

  正文: 凝集试验 玻片凝集试验 乳胶凝集试验 反向间接凝集试验 SPA协同凝集试验 免疫荧光技术 ELISA

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  含A蛋白 的金葡菌

  IgG类抗体

  结合IgG的金葡菌

  抗 原

  凝集

  协同凝集试验

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  标题: 细菌毒素的检测

  正文: 内毒素的检测:G-细菌感染 外毒素的检测:待检菌的鉴定,并区分产毒株与非产毒株

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  标题: 动物实验

  正文: 分离和鉴定病原微生物 测定细菌的毒力 制备免疫血清 建立致病动物模型 取动物的血清配制培养基 用于生物制品或一些药物的安全、毒性、疗效检验

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  标题: 细菌感染的分子生物学检测

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  分子诊断极大的节约时间

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  针对传染病的分子诊断技术被国际权威的《自然》、《科学》杂志列为改善发展中国家人民健康的十大生物技术之首!

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  标题: 细菌感染的分子生物学检测

  正文: 核酸杂交 聚合酶链反应(PCR) 生物芯片技术

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  标题: 核酸杂交

  正文: 核酸探针:带有标记物的、能与特定核酸序列发生特异性互补的已知序列核酸片段。 核酸杂交方法: 1.斑点杂交 2.菌落原位杂交 3.Southern印迹 4.Northern印迹

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  标题: 核酸杂交在临床微生物检测中的应用

  正文: 细菌分类鉴定 细菌快速鉴定 细菌耐药性的检测 细菌毒素的检测 细菌流行病学调查

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  正文: 聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)

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  标题: PCR扩增产物的分析

  正文: 凝胶电泳分析法 斑点杂交法 酶谱分析法 序列分析法

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  标题: PCR在临床微生物检验中的应用

  正文: 细菌的快速检测 细菌毒素的检测 细菌的耐药性的检测 细菌流行病学调查

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  标题: 基因芯片技术

  最早的生物芯片

  概念源于计算机芯片

  基本原理:微阵列技术,核苷酸固定到固体支持物上,将处理好的样品与其进行杂交,以实现对所测样品基因的大规模检验。

  特点:高通量、高集成、微型化、平行化、多样化和自动化

  1998年度世界10大科技进展之一

  发展迅速,应用日益广泛

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  标题: 基因芯片应用存在的问题

  不同实验室结果的比较

  芯片价格,实验成本

  微阵列质量控制MAQC

  蛋白质芯片的强势挑战

  自身存在的技术缺陷

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  标题: 蛋白质芯片技术

  双向凝胶电泳(2-DE)和质谱(MS)分析鉴定技术为蛋白质组学研究的两大核心技术

  蛋白质芯片是指以蛋白质分子作为配基,将其固定在固相载体的表面,形成的蛋白质微阵列

  分类:生物化学型芯片、化学型芯片和缩微芯片

  蛋白质芯片技术是继基因芯片之后,被称为横扫生物科学和医学界的一次“迷你”革命

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  标题: 分子诊断的质量控制

  正文: 标准化操作程序(SOP) 标准化实验室 室内质控和室间质评

  The FDA is Coming!

  方法原理、实验步骤、使用指征、报告格式,结果、标本、临床有效性等因素

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  正文: 传统方法目前不可替代 快速简便的分子诊断技术越来越普及 Jan Weile & Cornelius Knabbe;Current applications and future trends of molecular diagnostics in clinical bacteriology;Anal Bioanal Chem (2009) 394:731–742

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  标题: 本章要求掌握的内容

  正文: 细菌感染的病原学诊断方法有哪些? 细菌形态学检查包括:不染色标本检查法和染色标本检查法 细菌染色常用染料:碱性染料、酸性染料、复合染料 常用染色方法:革兰染色、抗酸染色和荧光染色

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  标题: 本章要求掌握的内容

  正文: 常用培养基的种类:基础、营养、鉴别、选择、特殊 糖类发酵试验原理:具发酵不同糖的酶。 氧化-发酵试验的原理:分解葡萄糖需不需氧 分子生物学方法检测细菌的优缺点

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