细菌的芽孢染色和荚膜染色.ppt

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　　标题： 实验二 细菌的芽孢染色和荚膜染色

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　　标题： 一、实验目的

　　正文： 学习并掌握细菌芽孢染色的原理及方法 学习并掌握细菌荚膜染色的原理及方法

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　　(Gp:) 孢外壁

　　(Gp:) 皮层

　　(Gp:) 核心壁

　　(Gp:) 孢子衣

　　标题： 二、实验原理

　　正文： 芽孢染色 什么是芽孢? 某些细菌在生长后期于细胞内形成的一种圆形、椭圆形的、厚壁、折光性高、含水量极低而抗逆性极强的内生休眠体。

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　　芽孢染色原理 芽孢有多层次致密厚壁，不易着色和脱色。采用着色力强的染液，并加热，以促进芽孢染色，而进入菌体的染液经水洗可脱去，采用对比性强的染液对菌体进行复染，使二者分别被染上不同颜色。 简单染色能否观察到芽孢?

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　　什 么 是 荚 膜?

　　荚膜是细菌细胞壁外形成的一层疏松透明的黏液状物质，主要成分为多糖，含水量达90%以上。

　　负染法 荚膜与染料间亲和力弱,不易着色，将菌体和背景分别染色，以衬托出不着色且透明的荚膜。 菌体不可加热固定!

　　如何观察荚膜?

　　2. 荚 膜 染 色

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　　标题： 三、 菌 种

　　正文： 芽孢染色 Bacillus subtilis (枯草芽孢杆菌) 37℃培养48 h 荚膜染色 Bacillus mucilaginosus (钾细菌(硅酸盐细菌)) 阿须贝培养基(无氮培养基)，正放于37℃温箱中三天

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　　阿须贝培养基： 甘露醇???????????????????????????? 10.0 g KH2PO4)????????????????????????? 0.2 g MgSO4·7H2O?????????????? 0.2 g NaCl?????????????????????????? ????? 0.2 g CaSO4·2H2O?????? ? 0.2 g CaCO3????????????????????????????? 5.0 g pH???????????????????????????????7.0～7.2

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　　标题： 四、实验步骤

　　正文： 涂片干燥固定 孔雀绿染色 冷却 水洗 番红复染 水洗 干燥镜检

　　加热5-10分钟

　　1分钟

　　加热染色注意安全!!!

　　1、芽孢染色

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　　标题： 2、荚膜染色的方法：

　　正文： 涂片 结晶紫染色 水洗 墨汁染色 干燥 镜检 在空气中风干,不可加热固定!! !

　　风干

　　稍风干

　　1分钟

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　　拉片的过程示意

　　荚膜染色

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　　标题： 四、结果与讨论

　　正文： 1 电子作业，文字描述显微照片。 2 P445 3 观察上次实验结果。