P物质、阿片肽在痛觉调制中的作用及药物对其影响.ppt

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　　标题：

　　P物质、阿片肽在痛觉调制中 的作用及药物对其影响

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　　标题： 主要内容

　　正文： 1.痛觉的调制及阿片肽、P物质在痛觉 调制中的作用 2.头痛宁胶囊及全蝎对实验性偏头痛大 鼠中脑阿片肽、P物质影响的初探

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　　标题： 痛觉调制及阿片肽、P物质在痛觉调 制中的作用

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　　标题： 痛觉传递和调制的相关解剖结构—— 痛觉的传导径路

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　　周围敏感化

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　　标题： 疼痛信号在脊髓中的传递

　　正文：

　　脊髓背角神经元 1. 投射神经元 非伤害性神经元 特异伤害性感受神经元 非特异伤害性感受神经元 2. 中间神经元 兴奋性中间神经元 抑制性中间神经元

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　　疼痛的解剖和生理

　　伤害性感受器 温度,机械,化学

　　Aσ 和 C纤维

　　脊髓后角1,2,5层

　　对侧脊髓丘脑束

　　丘脑VPL核

　　感觉皮质 边缘系统

　　脑 干 导水管周围灰质 蓝斑 5-HT NA

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　　标题： 痛觉调制的相关结构

　　1.脊髓水平的调制 2.内源性调制系统 3.间脑和端脑的调制

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　　标题： 脊髓水平的调制

　　正文： 富有生命力的“闸门控制学说”：在脊髓背角内存在一 个类似闸门的神经机制，控制着从外周向中枢神经系统发放 的神经冲动的强度，其解剖基础是脊髓后角各类神经元的相 互作用。

　　(Gp:) SG

　　(Gp:) T

　　(Gp:) 闸门控制系统

　　(Gp:) 作用系统

　　(Gp:) 中枢控制系统

　　(Gp:) 粗纤维

　　(Gp:) 细纤维

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　　标题： 内源性痛觉调制系统

　　微量注射吗啡

　　PAG

　　电刺激

　　下行抑制系统激活

　　神经降压肽

　　延髓中缝核神经元激活

　　脑干中缝旁网状核团

　　脊髓背外侧索

　　脊髓背角Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ

　　镇痛

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　　1. 丘脑：丘脑接受来自脊髓、脑干的纤维投射，经过丘脑的中继投 射到大脑皮质。 2. 边缘系统：在疼痛时常伴有强烈的情绪变化，这与边缘系统的功 能有关。 3基底神经节：尾状核是基底神经节中最大的核团，有资料显示，刺 激尾状核头能能产生镇痛作用。 4. 大脑皮质：大脑皮质的功能在于痛觉的分辨而不是痛觉的感受。

　　标题： 间脑和端脑的调制

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　　标题： 内源性阿片肽在痛觉调制中的作用

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　　标题： 内源性阿片肽的成员

　　内源性阿片肽：是哺乳动物体内天然形成的 具有阿片样作用的肽类物质的总称。 脑啡肽系统：甲硫氨酸-脑啡肽、亮氨酸-脑啡肽、甲七肽和甲八肽; 内啡肽系统：主要是β-内啡肽(β-END)： 31肽 还包括1~27肽、1~26肽、1~17肽。 强啡肽系统：强啡肽A、强啡肽B及α-新内啡肽等。 称为经典阿片肽，分别来源于3种前体大分子，即脑啡肽原、阿黑皮素原、强啡肽原。 内吗啡肽和孤啡肽。 阿片受体; μ受体、δ受体、κ受体

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　　标题： 内源性阿片肽的作用

　　在各种神经肽中，阿片肽是与疼痛及镇痛关系最直接、最密切的一类神经肽。尽管发现不少神经肽都参与疼痛传递及调制，但它们的作用大多数与阿片肽有着直接或间接的联系。

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　　标题： 内源性阿片肽的主要作用部位

　　脑啡肽：在脑内和脊髓均有镇痛作用，但其脑内含量远大于脊髓， 因此以脑内作用为主。 内啡肽：β-END能神经元集中在下丘脑弓状纤维，它的投射纤维主要 为PAG和中缝背核。因此β-END 发挥作用的主要部位在脑内。 强啡肽：在脊髓发挥显著的镇痛作用，而在脑内作用复杂。

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　　标题： 脊髓水平的调制

　　脊髓背根神经节合成阿片肽

　　随中枢突进入脊髓后角

　　传入纤维的突触前膜

　　前膜阿片受体

　　突触前抑制作用

　　突触后间隙

　　后膜阿片受体

　　抑制cAMP酶活性

　　抑制Ca ++开放

　　释放谷氨酸、SP 和其他损伤性递质减少

　　促进K+电导

　　细胞膜超极化

　　感受器动作电位时程降低

　　提高痛阈

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　　标题： 下行抑制系统的调制

　　PAG等脑干核团

　　下行抑制系统激活

　　延髓中缝核神经元

　　脑干中缝旁网状核团

　　脊髓背外侧索

　　脊髓背角Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ

　　镇痛

　　海马等高级中枢

　　EOP神经元兴奋性

　　释放EOP

　　与阿片受体结合

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　　标题： P物质在痛觉调制中的作用

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　　正文：

　　1931年，Von Euler和Gaddum首次从马的肠和脑内发 现一种具有引起肠平滑肌收缩、血管舒张和降低血压作用的 物质，命名为P物质(substance P,SP),是速激肽家族成员，也是最早发现的神经肽。 SP的分布: 在脑、脊髓、背根神经节及机体多种组织细胞都有 SP及其受体的存在。 SP受体: NK1受体被认为是P物质特异受体。属G蛋白耦联 受体，第二信使：IP3和Ga2+ , 效应器:Cl-通道。

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　　标题： SP在伤害感受的外周传入和脊髓水平的痛觉调制

　　背根神经节 细胞(DRG)

　　SP合成

　　轴浆 运输

　　脊髓背角

　　SP释放

　　脊髓背角I层神经元的SPR

　　NMDA诱导的背角神 经元内Ca2+ 增加

　　痛敏感 性

　　神经末梢

　　激活感受器

　　SP释放

　　通过局部回路加强 阿片肽的镇痛效果

　　伤害性刺激

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　　标题： SP与脊髓以上水平的痛觉调制

　　在脑内，主要是中脑，SP可以促进脑啡肽释放，起镇痛作用。给小鼠脑内注SP，可引起明显的镇痛作用，且可被纳洛酮所翻转。 SP与吗啡有交叉耐受性：给大鼠中脑中央灰质注入SP后也可出现明显 的镇痛作用，并可纳洛酮所阻断;对吗啡耐受的小鼠，注入SP也不产生镇 痛。因此有人认为，SP也可作为一种内源性阿片样物质。有报道认为β-内 啡肽(β-endorphin，β-END)参与介导SP在脑内的镇痛作用。

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　　标题： SP对痛觉的调制

　　SP对痛觉信息的传递可能起双重作用： 1. 作为伤害信息传入纤维的神经递质，在脊髓背角、 三叉神经脊束核等部位对痛觉传递的第一级突触起 促进或易化作用。 2. 在脑内则发挥镇痛作用，对痛觉感受进行调制，降 低对痛觉的敏感度。

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　　标题：

　　头痛宁胶囊及全蝎对偏头痛大鼠中脑阿片肽和P物质影响的初探

　　于挺敏 吉林大学第二医院

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　　头痛宁胶囊是临床上应用较多，疗效为多数病人和医生认可的中成药制剂，在临床上主要用于偏头痛、紧张型头痛的治疗。其主要成分之一全蝎是中医治疗各种风湿痹痛、三叉神经痛、头痛、癌肿疼痛的常用组分。为了了解头痛宁胶囊、全蝎是否对痛觉调制系统中阿片肽、SP产生影响，我们设计了本研究。

　　立题意义

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　　本研究通过观察全蝎以及头痛宁胶囊对偏头痛大鼠内 源性痛觉调制系统的核心结构——中脑中P物质及内源性阿 片肽的影响，研究全蝎以及头痛宁胶囊治疗偏头痛的中枢 作用，初步探讨全蝎及头痛宁胶囊治疗头痛的可能机制。

　　立题意义

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　　Wistar大鼠30只

　　对照组

　　偏头痛组

　　偏头痛大鼠模型

　　提取总RNA

　　光学显微镜

　　中脑导水管周围灰质区SP、亮氨酸脑啡肽和 β-内啡肽的分布及表达

　　观察行为学变化

　　中 脑

　　免疫组织化学染色

　　“头痛宁”治疗组

　　“全蝎”治疗组

　　“头痛宁”对照组

　　“全蝎”对照组

　　SP片段

　　脑啡肽原片段

　　重组质粒标准品

　　荧光定量标准曲线

　　SP mRNA 绝对定量

　　脑啡肽原 mRNA 绝对定量

　　脑组织

　　提取总RNA

　　SP、脑啡肽原片段

　　技术路线

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　　动物分组 选用成年健康Wistar大鼠30只，体重210±10g，分6组,每组5只： A组：对照组 B组：偏头痛组 C组：头痛宁胶囊对照组 E组：全蝎对照组 D组：头痛宁胶囊治疗组 F组：全蝎治疗组

　　实验方法

　　头痛宁胶囊 3.75g/Kg·d灌胃 给药7天

　　全蝎粉 0.26g/Kg·d 灌胃给药 连续给药7天

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　　免疫组化

　　Wistar大鼠30只

　　对照组

　　偏头痛组

　　“头痛宁” 治疗组

　　“全蝎” 治疗组

　　“头痛宁” 对照组

　　“全蝎” 对照组

　　皮下注射生理盐水 2mL/kg

　　皮下注射硝酸甘油 10mg/kg

　　造模成功的指标：频繁挠头、爬笼、咬尾、往返运动

　　荧光定量PCR

　　60min-90min

　　行为学评价：挠头、爬笼、咬尾、往返运动的次数总和 (每个症状出现1次计1分)

　　中脑MNK、 β-内啡肽，SP检测

　　2h

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　　结果1：各组大鼠行为学评价

　　头痛宁治疗组和全蝎治疗组大鼠行为评分明显低于偏头痛组， 头痛宁治疗组大鼠行为学评分较全蝎治疗组评分更低。

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　　结 果2. 全蝎对实验大鼠中脑脑啡肽原mRNA表达

　　全蝎可以降低正常大鼠中脑脑啡肽原基因表达，而当大鼠头痛时却可以提高其中脑脑啡肽原的基因表达。

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　　结 果3.全蝎对实验大鼠中脑P物质 mRNA表达

　　偏头痛大鼠中脑P物质 mRNA表达减少;全蝎给药组大鼠中脑P物质 mRNA表达较对照组和偏头痛组无显著差异

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　　结 果3.全蝎对实验大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽免疫阳性细胞数的影响

　　(Gp:) 对照组

　　(Gp:) 偏头痛组

　　(Gp:) 全蝎对照组

　　(Gp:) 全蝎治疗组

　　(Gp:) 各组

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　　结 果3.全蝎对实验大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽免疫阳性细胞数的影响

　　(Gp:) 各组之间无显著差异

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　　结 果4.全蝎对实验大鼠PAG区β-内啡肽阳性细胞数的影响

　　(Gp:) 对照组

　　(Gp:) 偏头痛组

　　(Gp:) 全蝎对照组

　　(Gp:) 全蝎治疗组

　　(Gp:)

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　　结 果4.全蝎对实验大鼠PAG区β-内啡肽阳性细胞数的影响

　　全蝎治疗组大鼠中脑PAG区β-内啡肽阳性细胞明显增多

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　　结 果5.头痛宁胶囊对实验大鼠中脑脑啡肽原基因表达的影响

　　头痛宁胶囊可以降低正常大鼠中脑脑啡肽原基因表达，而当大鼠头痛时却可以提高其中脑脑啡肽原的基因表达

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　　结 果6.头痛宁胶囊对实验大鼠中脑P物质 mRNA表达的影响

　　偏头痛大鼠中脑P物质 mRNA表达减少;头痛宁给药组大鼠中脑P物质 mRNA表达较对照组和偏头痛组无显著差异

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　　结 果7.头痛宁胶囊对实验大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽阳性细胞数的影响

　　对照组

　　偏头痛组

　　头痛宁胶囊对照组

　　头痛宁胶囊治疗组

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　　结 果7.头痛宁胶囊对实验大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽阳性细胞数的影响

　　头痛宁治疗组大鼠中脑PAG区亮氨酸脑啡肽阳性细胞明显增多

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　　结 果8.头痛宁胶囊对实验大鼠PAG区β-内啡肽阳性细胞数的影响

　　(Gp:) 对照组

　　(Gp:) 偏头痛组

　　(Gp:) 头痛宁对照组

　　(Gp:) 头痛宁治疗组

　　(Gp:) 各组

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　　结 果8.头痛宁胶囊对实验大鼠PAG区β-内啡肽阳性细胞数的影响

　　头痛宁治疗组大鼠中脑PAG区β-内啡肽阳性细胞明显增多

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　　结 果

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　　结 论

　　1.全蝎及头痛宁胶囊均可减轻实验性偏头痛大鼠的行为学反应，说明 具有抵抗头痛作用，而头痛宁胶囊较全蝎更为有效。 2.全蝎可以增加偏头痛大鼠中脑脑啡肽原基因的表达，而亮氨酸脑啡 肽阳性细胞并无变化，可能促进了亮氨酸脑啡肽以外的其他脑啡肽的 表达。 3.头痛宁胶囊使脑啡肽原基因表达增加，同时亮氨酸脑啡肽阳性细胞 增加，说明头痛宁胶囊通过促进亮氨酸脑啡肽表达增加而发挥治疗 头痛的作用。 4.全蝎及头痛宁胶囊均可促进PAG区β-内啡肽的表达，发挥止痛作用。 5.而全蝎及头痛宁胶囊均对P物质基因及蛋白的表达无影响，说明全蝎和头痛宁胶囊止痛作用不是通过影响P物质的变化来实现的。

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　　偏头痛诊断与防治专家共识

　　谢谢