第三章 药物的杂质检查概述.ppt

　　第三章药物的杂质检查

　　Test for purity

　　第三章 药物的杂质检查 Test for purity

　　概 述

　　一般杂质检查

　　特殊杂质检查

　　有效性　针对某些药效进行检查的项目 如Al(OH)3的制酸力，反映主要质量; 明胶的凝冻度，控制物理性能; 利福平的结晶度，影响生物利用度 均一性　含量均一性 如“含量均匀度”试验

　　一、 概 述

　　安全性　 进行异常毒性、热原、降压物质和无菌等项目 纯度要求 对杂质限量进行检查 化学试剂与药物制剂纯度的区别?

　　一、 概 述

　　例：纯度要求 Pethidine Hydrochloride盐酸哌替啶

　　无效异构体I 无效异构体 II

　　二、杂质来源与种类  source and sorts of impurities

　　1. 制备过程中产生

　　酸度：水解试剂带入 乙醇中不溶物：水解中间体(糊精) SO32-：产品用H2SO3漂白 可溶性淀粉：水解不完全

　　2.贮藏过程中产生

　　外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、 微生物等引起药物产生

　　例如： 麻醉乙醚 醛及有毒的 过氧化物

　　(1)一般杂质： 在多种药物中普遍存在的杂质。 (Cl- SO42- Pb As Fe) 有害杂质 ( Pb As ) 信号杂质 (Cl- SO42-)：考察生产工艺， 反映药物的纯度水平 (2)特殊杂质： 个别药物的生产及贮藏中引入的杂质。

　　杂质的种类

　　杂质的限量：药物中所含杂质的最大允许量。 限量表示(g/g) ：百分之几(%) 百万分之几(10-6) 限量检查： 检查所含杂质是否超过杂质限量的规定， 通常不要求测定其准确含量。

　　3、杂质的限量检查(limit test)

　　杂质限量检查方法

　　取一定量 (C·V) 与被检杂质相同的纯品或对照品配成对照品溶液，与一定量(S)药物供试溶液在相同条件下处理后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过规定。

　　(Gp:) NaCl对照液

　　(Gp:) 葡萄糖

　　(Gp:) ?稀硝酸10ml ?硝酸银1ml

　　(Gp:) ?稀硝酸10ml ?硝酸银1ml

　　对照液浊度 > 供试液浊度

　　杂质限量的计算：

　　式中： L 杂质的限度(%) C 对照液浓度 (?g/ml)  V 对照液的加入体积(ml) S 供试品的量(g) 注意: 单位统一

　　例 1 ： 对乙酰氨基酚中氯化物的检查： 样 2.0g 溶于100ml水中，取25ml检查Cl-，与标准NaCl溶液(10μg/ml) 5ml对照液相比，不得更深。 C= 10μg/ml V=5.0ml S= 25? 2.0 ? 100=0.5g

　　第二节 一般杂质检查方法

　　条件：硝酸酸性条件(稀硝酸10ml) 反应试剂：硝酸银试液 1.0ml 杂质对照：NaCl (10μg/ml) 灵敏度范围： 50~80 ?g / 50ml 讨论：选择稀硝酸反应条件的意义。

　　一 、氯化物(Chloride )检查 原理：

　　比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。 平行操作原则。 3. 若供试品有色，需经处理后方可检查。

　　注 意：

　　)干扰及排除

　　(1)外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查， 可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。

　　(2)内消色法：倍量法

　　供试品有色处理方法

　　内消色法：中国药典附录规定方法。

　　供试品

　　+ AgNO3

　　放置10min

　　澄清溶液

　　+标准NaCl

　　+水

　　对照溶液

　　供试品

　　+ AgNO3

　　+水

　　供试品溶液

　　(Gp:) 暗处放置5min后比较

　　二 、重金属(Heavy Metals )的检查

　　1、第一法 硫代乙酰胺法 适用对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物 原 理： Pb2+ + 醋酸盐缓冲液 + 硫代乙酰胺(CH3CSNH2) ? PbS ?(黄~棕黑) 条件： 　　介质：醋酸盐缓冲液 (pH 3.5) 2ml 　　试剂：硫代乙酰胺 (CH3CSNH2) 2ml 　　杂质对照液： PbNO3 (10μg/ml) 　　灵敏度范围： 10~20 ?g / 27ml

　　葡萄糖中重金属的检查：样4.0g溶于23ml水，加入2ml缓冲盐，依法检查，其重金属不得超过 百万分之五，取标准铅( 10μg/ml)，v=? C= 10μg/ml L= 5 ? 10-6 S=4.0g

　　V = 2.0 ml

　　例 2：

　　注意：供试品如有色，需经处理后方可检查。

　　1. 外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。 2. 内消色法。 3. 改用第四法，微孔滤膜过滤法。

　　第二法：含芳环或杂环的有机药物 如苯佐卡因、甲硝唑 第三法: 溶于碱的药物或在稀酸产生 沉淀的药物 如磺胺类、巴比妥类 第四法： 铅斑法

　　C 垫圈(外径10mm,内径6mm) D 滤膜(直径10mm,孔径3.0μm) E 辅助滤板

　　CD

　　A

　　B

　　F

　　E

　　滤器下部

　　滤器上盖

　　连接头

　　微孔滤膜过滤法检查重金属装置

　　三、砷 盐 (arsenic)

　　第一法 古蔡氏法 Gutzeit 第二法 Ag-DDC法 白田道夫法 Bettendorff

　　国内外常用方法：

　　古 蔡 氏 法 ：

　　SbH3+HgBr2→SbH2(HgBr)+HBr 锑斑

　　Zn+HCl

　　白田道夫法

　　检查砷盐仪器装置

　　8cm

　　18cm

　　有孔玻璃旋塞

　　导气管

　　AsH3发生瓶

　　二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag-diethyldithiocarbamate Ag-DDC法

　　四、干燥失重 ( loss on drying)

　　恒温干燥 干燥剂干燥 减压干燥 热分析法 thermal analysis,TA

　　干燥失重物主要指水分 (结晶水或吸附水) 或挥发性物质

　　在程序控制温度下,测量物质的质量与温度关系的方法

　　热重分析法thermal gravimetric analysis,TGA :

　　差示热分析法

　　在程序控制温度下,测定供试品与 参比物质之间的温差(ΔT)随温 度变化的函数关系

　　differential thermal analysis,DTA:

　　草酸钙(CaC2O4·H2O)的热重曲线

　　(Gp:) ΔG1

　　(Gp:) ΔG2

　　(Gp:) ΔG3

　　(Gp:) 1000

　　(Gp:) 800

　　(Gp:) 600

　　(Gp:) 400

　　(Gp:) 200

　　(Gp:) 0

　　(Gp:) W

　　(Gp:) T1

　　(Gp:) T2

　　(Gp:) T3

　　(Gp:) 398

　　(Gp:) 838

　　(Gp:) 635

　　(Gp:) 478

　　(Gp:) 134

　　(Gp:) 226

　　(Gp:) T(℃)

　　(Gp:) 在温度T1时 CaC2O4·H2O CaC2O4+H2O

　　(Gp:) 在温度T2时 CaC2O4 CaCO3+CO

　　(Gp:) 在温度T3时 CaCO3 CaO+CO2

　　(Gp:) ·

　　(Gp:) ·

　　(Gp:) ·

　　(Gp:) 样品

　　(Gp:) 参比

　　(Gp:) 加热炉

　　(Gp:) 至信号放大器

　　(Gp:) 加热器 导线

　　(Gp:) 炉温 控制器

　　⑴热差曲线的直线

　　⑶吸热峰

　　⑵放热峰

　　(Gp:) ⑶

　　(Gp:) ⑴

　　(Gp:) ⑵

　　(Gp:) T(℃)

　　(Gp:) △T

　　热差曲线示意图

　　差示热分析仪主要结构简图

　　盐酸多巴酚丁胺的DTA-TGA曲线

　　(Gp:) 100

　　(Gp:) 90

　　(Gp:) 80

　　(Gp:) 70

　　(Gp:) 60

　　(Gp:) DTA

　　(Gp:) T(℃/min)

　　(Gp:) 196℃

　　(Gp:) 233℃

　　15℃/min Program

　　1、纯双氯青霉素转变成液态并降解 2、加入乳糖 3、加入硬脂酸镁 4、加入硬脂酸，主成分峰消失 5、单加入硬脂酸，主峰亦消失

　　(Gp:) ℃

　　(Gp:) 0

　　(Gp:) 100

　　(Gp:) 200

　　(Gp:) △T

　　(Gp:) 1

　　(Gp:) 2

　　(Gp:) 3

　　(Gp:) 4

　　(Gp:) 5

　　DTA扫描图

　　甲磺酸二氢麦角毒碱的DSC-TGA曲线

　　(Gp:) ℃

　　(Gp:) 50

　　(Gp:) 100

　　(Gp:) 150

　　(Gp:) 200

　　(Gp:) DSC

　　(Gp:) TGA

　　(Gp:) t(min)

　　(Gp:) △T

　　不纯物质的DSC图

　　不同纯度苯甲酸的DSC曲线

　　(Gp:) 温度

　　(Gp:) 97.2%

　　(Gp:) 98.6%

　　(Gp:) 标准品

　　温度(℃)

　　50 80 110 140 170 200 230 260 290

　　15.00

　　0.00

　　7.50

　　盐酸舍曲林晶型Ⅰ的DSC曲线

　　mcal/sec

　　温度(℃)

　　50 80 110 140 170 200 230 260 290

　　5.00

　　0.00

　　2.50

　　mcal/sec

　　盐酸舍曲林晶型Ⅲ的DSC曲线

　　有机溶剂残留量测定法

　　有机溶剂 限度,%　 限度,% 　　　 苯　　 0.01 0.0002 氯仿 0.005 0.006 二氧六环 0.01 0.038 二氯甲烷 0.01 0.06 吡啶 0.01 0.02 甲苯 0.01 0.089 环氧乙烷 0.001 0.001 Ch.P(95) Ch.P(2000)

　　六、有机溶剂残留量测定

　　色谱系统与系统适用性试验 System Suitability Tests; SSTs 以直径为0.25~0.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相，柱温为80~170℃;并符合下列条件： ⑴用待测物的色谱峰计算的N应大于1000; ⑵内标物与待测物的两个色谱峰的R≥1.5; ⑶每个标准溶液进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比的RSD≤5%; 若以外标法测定，所得待测物峰面积的RSD≤10%

　　嗅味及挥发性的差异颜色的差异溶解行为的差异旋光性质的差异吸附或分配性质的差异对光选择吸收性质的差异

　　第三节 特殊杂质检查

　　物理性质上差异：

　　酸、碱性质的差异氧化还原性的差异杂质与一定试剂产生沉淀杂质与一定试剂产生颜色反应杂质与一定试剂反应产生气体

　　化学性质上差异：

　　旋光性质的差异

　　Ch.P规定黄体酮在乙醇中的比旋度为：+186°～198° 黄体酮及其中间体的比旋度(溶剂：乙醇) 化合物　　 浓度%　 温度℃ [а]D 黄体酮 　 1～1.4　 20～25　 +193°±4° 醋酸双烯醇酮 0.9 20 -31°±2° 醋酸妊娠烯醇酮 ～1 常温 +20°±2°

　　220 260 300 nm

　　肾上腺酮及肾上腺素的紫外吸收曲线

　　λmax310nm

　　吸附或分配性质的差异薄层色谱法 TLC

　　一般要求： 颗粒直径10~40μm 薄层涂布：无粘合剂 含粘合剂：常加入 10~15% 煅石膏 (CaSO4·2H2O,180℃烘4h) 或0.5~0.7%羧甲基纤维素钠水溶液

　　(Gp:) 比移值

　　常 用 方 法：

　　杂质对照品法 供试品自身对照法 对照药物法

　　供试品10μl N-甲基哌嗪10μl 50mg/ml 50μg/ml

　　枸橼酸乙胺嗪 I2蒸气显色

　　规定： 如显杂质斑点，不得多于2个，其颜色与对照品主斑点相比较，不得更深。

　　地塞米松磷酸钠 地塞米松 20mg/ml 0.20mg/ml

　　如有1~2个杂质点超过时，应不得深于0.01%对照液的主斑点。 其中有1个杂质点应不深于0.002%供试品的主斑点。

　　氨苯砜中检查“有关物质”规定：

　　0.01%供试品

　　100μg/ml

　　1%供试品

　　10mg/ml

　　0.002%供试品

　　20μg/ml

　　高效液相色谱法 HPLC

　　主 要 方 法：

　　峰面积归一化法 不加校正因子的主成分自身对照法 加校正因子的主成分自身对照法：用于有杂质对照品时，杂质的含量测定。 内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量：用于有杂质对照品时，杂质的含量测定。 外标法测定供试品中某个杂质或主成分的含量：用于有杂质对照品或杂质对照品易制备的情况。

　　Ⅰ供试品 Ⅱ供试品+内标

　　(Gp:) 内标峰

　　(Gp:) 内标峰

　　(Gp:) 杂质

　　(Gp:) 杂质