药品生物检定技术.ppt

　　第一章 绪论

　　第一节 药品生物检定的基本概念 第二节 药品生物检定的任务和应用

　　第一节 药品生物检定的基本概念

　　一、药品生物检定的含义 二、药品生物检定方法

　　生物检定法(Bioassay)是利用生物体包括整体动物、离体组织、器官、细胞和微生物等评估药物生物活性(包括药效和毒性)的一种方法。

　　一、药品生物检定的含义

　　第一节 药品生物检定的基本概念

　　生物体

　　整体动物：家兔(热原检查)豚鼠(过敏物质检查) 猫(降压物质检查)小鼠(异常毒性物质检查) 离体组织：新鲜人血(进行肝素效价测定) 器官：大鼠离体子宫(缩宫素效价测定) 细胞：家兔红细胞(溶血与凝集检测) 微生物：细菌(抗生素效价测定)

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　　()是利用生物体包括整体动物、离体组织、器官、细胞和微生物等评估药物生物活性(包括药效和毒性)的一种方法。 A理化性质检测法 B生物检定法 C微生物检测法 D色谱法 E光谱法

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　　以下不属于生物检定法的是()。 A铁盐的检查 B内毒素的检查 C无菌检查 D微生物限度检查 E抗生素残留量检查

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　　下列哪些药物的含量测定需要生物检定法()。 A硫酸镁口服液 B阿司匹林肠溶片 C复方硫酸软骨素滴眼液 D肝素钠注射液 E布洛芬缓释胶囊

　　芬必得是葛兰素史克公司的止痛药品牌， 目前在中国由合资公司中美史克运营，在国内有四款主要止痛产品:芬必得布洛芬缓释胶囊、芬必得乳膏、芬必得头痛装、芬必得酚咖片(新头痛装)。布洛芬是有效的环氧合酶抑制剂，具有解热、镇痛及抗炎作用。 适用于①缓解类风湿关节炎的关节肿痛症状②急性的轻、中度疼痛如：手术后、创伤后、劳损后、原发性痛经、牙痛、头痛等; ③对成人和儿童的发热有解热作用。

　　阿司匹林是一种历史悠久的解热镇痛药，诞生于1899年3月6日。用于治感冒、发热、头痛、牙痛、关节痛、风湿病，还能抑制血小板聚集，用于预防和治疗缺血性心脏病、心绞痛、心肺梗塞、脑血栓形成，应用于血管形成术及旁路移植术也有效。

　　本品为复方制剂，主要成分为每毫升中含硫酸软骨素钠1毫克、维生素E0.1毫克、维生素B60.1毫克、尿囊素2毫克、牛磺酸2毫克。辅料为：玻璃酸钠、硼酸、硼砂、冰片、薄荷脑、无水乙醇、聚山梨酯80、三氯叔丁醇 硫酸软骨素为一种酸性粘多糖，是眼组织中的重要成份之一，具有促进角膜水分代谢、改善微循环、保护角膜并促进角膜组织损伤修复的功能，同时还可在角膜表面形成一层保护膜，防止水分散发，有效缓解视疲劳和干眼症状;牛磺酸除可抗菌消炎外，在眼组织内还参与多种生理活动，促进新陈代谢，改善视疲劳。

　　肝素是哺乳动物体内的一种黏多糖，与蛋白质结合在一起存在于肠粘膜、肺、肝等器官内。 肝素钠(Heparin sodium)能干扰血凝过程的许多环节，在体内外都有抗凝血作用。其作用机制比较复杂，妨碍凝血激活酶的形成、阻止凝血酶原变为凝血酶，抑制凝血酶，从而妨碍纤维蛋白原变成纤维蛋白，从而发挥抗凝作用。 1.预防血栓形成和栓塞 2.其他体内外抗凝血，如心导管检查、心脏手术体外循环、血液透析等。

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　　生物检定主要用于()。 A有合理的理化方法进行检定的药物 B没有合理的理化方法进行检定的药物 C药品一般杂质的检查 D药品特殊杂志的检查 E用理化方法能反映出临床实际疗效的药物

　　生物检定以药理作用为基础，以生物统计为工具，运用特定的实验设计，在一定条件下比较供试品和标准品或对照品所产生的特定反应(如抑菌圈直径、惊厥反应指标、血压、血糖、重量等)，通过等反应剂量间比例的运算或限值剂量引起的生物反应程度，从而测得供试品的效价(Potency) 、生物活性或杂质引起的毒性(Toxicity)。

　　生物药物主要是指由动物脏器、微生物或体液等提取的，有效成分不够确切，多组分、结构复杂，理化方法不能有效鉴定并具有生物活性的天然生化药物、中药，以及某些生物技术药物。由于其空间结构的细微变化，影响药物的活性中心位点，目前在质量标准中控制中，《中国药典》2020版规定用生物检定法来评估药物的生物活性。

　　生物检定可以看作为一种测量的工具，它贯穿于药品生产的全过程中，生物鉴定在药品(主要是生化药物)、生物制品(疫苗、血液制品)中药的质量控制中发挥着极为重要的作用。

　　药品生物检定方法是利用药物对生物体的作用，把供试品(T)和标准品(S)，在同等条件下进行比较，计算出供试品效价的方法，因此它属于对比检定法。根据测定方法不同，生物检定方法可分为直接测定法和量反应的平行线测定法。

　　二、药品生物检定方法

　　直接测定法就是在较短的时间内准确地测得各个动物对S和T的最小效量的方法。某些药物注入动物体内后，反应指标(如死亡、心跳停止、痉挛、血液或血浆的凝结等)明确可靠，能清楚地分辨并记录达到该特定反应指标的最小效量。

　　该法的优点是可使用较少量的动物直接测得T和S的等反应剂量，比较简单，但受药物性质及给药方法的限制，在生物检定中应用不多，如洋地黄效价测定(鸽法)。

　　量反应平行线测定法系指药物对生物体所引起的反应(如血压、血糖的变化值)随着药物剂量的增加而产生变化。量反应平行线测定法，要求在一定剂量范围内，S和T的对数剂量x和反应或反应的特定函数y呈直线关系，当S和T的活性组分基本相同时，两直线平行。

　　生物检定可分为体内测定(in vivo) 、体外测定(in bitro)。 体内测定的受试对象一般是整体动物，给药后，观察规定时间内的反应，这时的反应代表了药物对整个动物的反应。例如，绒促性素的生物检定法(幼小鼠子宫增重法)。

　　体外测定的受试对象一般指细胞、酶、受体等。例如，细胞毒性试验。系指利用体外法检测医疗器械或药物等供试品对细胞生长和增殖的影响，以判断其对细胞的潜在毒性作用。试验用的细胞株为小鼠成纤维 细胞L—929。

　　第二节 药品生物检定的任务和应用

　　一、药品生物检定的任务 二、药品生物检定的应用

　　1.药品的效价测定 药品的效价测定是生物检定的基本任务。《中国药典》(2020年版)规定了各种激素药品的生物检定法、各种抗生素的微生物效价测定法，还收载了菌苗、疫苗、抗毒素、类毒素等效力测定法。

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　　2.药品安全性的检查 《中国药典》(2020年版)规定有多种药品要进行安全性检查，以保证用药安全。例如，无菌制剂(各种注射剂、眼用及外伤用制剂、植入剂、可吸收的止血剂、外科用敷料、器材等)均不得含有活菌。很多药品需进行有害物质的检查，如降压物质、升压物质检查，异常毒性或特性毒性检查，热原、细菌内毒素检查，过敏物质的过敏反应检查、葡萄糖锑钠毒力检查，溶血与凝集检查等。非无菌制剂(口服片剂、液体制剂等)需进行微生物限度检查，药品中不得含有控制菌，且染菌量不得超过一定限度。

　　3.检验方法的核对 有些药品理化性质虽然已经阐明，也建立了较为灵敏的理化检验方法，但这些方法是否可靠却要用生物检定法来核对。这是因为药品生物检定反映出的生物活性，在很大程度上与临床的疗效是一致的，而某些理化检验方法却只反映出药品的某一方面的理化性质，它并不一定与临床的疗效相平行。

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　　例如： 肝素的测定 激肽释放酶(血管舒缓素)的效力测定 胰岛素的检定

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　　4.神经介质、激素及其他微量生理活性物质的测定 由于神经介质、激素及其他微量生理活性物质具有微量、生理活性强的特点，生物检定方法往往具有更高的灵敏度和专一性。此外，生物检定法一般对样品的纯化要求不高，在样品处理上较理化方法的要求更低，甚至组织液亦可直接测定而不受干扰，有的还可以用专一的拮抗剂阻断其他类似物的作用，使测定更具有专一性，因此在一些作用机制研究中往往采用生物检定法。

　　(一)药品质量的控制 药品质量的特性包含有效性、安全性、稳定性、均一性和方便性。其中前三项为关键的质量特性，不具备这三种特性，便不能成为合格的药品。生物检定在检查药品有效性和安全性方面发挥着重要作用。

　　第二节 药品生物检定的应用

　　中国药典规定的需要进行生物检定的药品包括： 激素类 细菌类疫苗 病毒类活疫苗 免疫血清及毒素 人免疫球蛋白及凝血因子 细胞因子 抗生素类 其他类

　　(二)新药研究 (三)中药研究

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