乳腺癌前哨淋巴结术中分子诊断的临床实用性.ppt
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标题: 乳腺癌前哨淋巴结术中分子诊断的临床实用性
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标题: GeneSearchTM乳腺淋巴结检测试剂盒
正文: 美国FDA批准的首个用于诊断乳腺癌是否有淋巴结转移的分子技术 2007年被《时代周刊》评为十大医学进步第二名 乳腺球蛋白(MG)和CK19 快速确定是否存在>0.2mm的转移癌
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一项比较GeneSearchTM乳腺淋巴结(BLN)检测试剂和永久病理切片检测乳腺癌患者腋窝前哨淋巴结转移的前瞻性、国内多中心临床实验
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Diagram 2
Diagram 2
对复旦大学附属肿瘤医院2009年2月-6月诊治的88例乳腺癌患者行SLN活检 所有淋巴结分别进行GeneSearch检测和术后连续切片,将GeneSearch与术后连续切片的病理结果进行比较分析
材料及方法
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标题: 具体步骤-第一步
垂直于长轴,将淋巴结切成2mm厚的组织块,其中奇数块印片后进行GeneSearch检测,偶数块进行术后永久连续切片
(Gp:) 永久连续切片
(Gp:) 印片后 做GeneSearch
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标题: 第二步
奇数号组织块置于匀浆 液中进行匀浆后,抽提 RNA
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标题: 第三步
将抽提出的RNA样品依次加入Master Mix液和Enzyme Mix液,并设定阴阳性对照
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标题: 第四步
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电脑软件显示荧光值 和Ct值,并以报表形 式直接给出阴阳性结 果,不需人工对结果 进行判读
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标题: 结果(1)
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88例患者有效,仅1例男性,余为女性 平均年龄57.35岁(28-79岁),中位年龄60岁 成功检测到229枚SLN,平均每人2.6枚 连续切片:阴性SLN数为190枚(其中4例ITC), 宏转移29枚,微转移10枚
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标题: 结果(2)
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(Gp:) 6
(Gp:) 12
(Gp:) 66
(Gp:) 1
(Gp:) 2
(Gp:) 1
(Gp:) 24
DCIS:导管原位癌 IDC:浸润性导管癌 ILC:浸润性小叶癌
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标题: GeneSearch结果
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从切割淋巴结开始到最终形成报告共耗时35-45min,平 均40min 阴性SLN数为192枚,阳性SLN为37枚
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标题: GeneSearch结果 Vs术后连续切片
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敏感度:82.05% 特异性:97.37% 阳性预测值:84.49% 阴性预测值95.35% 两者的总体符合率:94.75%
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标题: 分层统计
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标题: 分析及讨论
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全球女性发病率最高的恶性肿瘤 根治术→改良根治术、保乳、微创 腋窝淋巴结→最重要的预后指标
腋窝淋巴结清扫:Axillary Lymph Node Dissection,ALND 上肢水肿、疼痛、淋巴水肿、手臂运动功能受损和肩部僵硬
前哨淋巴结活检:Sentinel Lymph Node Biopsy,SLNB 损伤忽略不计,准确预测腋窝状态,阴性者避免性ALND
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标题: 分析及讨论
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AJCC(美国癌症联合会)及UICC(国际抗癌联盟) ITC:转移肿瘤直径≤0.2mm →pN0(i+) MIC:转移肿瘤直径介于0.2mm与2mm之间→pN1mi 宏转移 :>2mm 诸多细节问题未给出明确的界定,影响诊断重复性!
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标题: 分析及讨论
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传统检测方法:术中细胞印片 仅对切面印片,量少细胞转移无法检测,需经验丰富的细胞病理学家 术中冰冻切片 费时、组织损耗、费用较高、难以评估脂肪化的淋巴结 术后连续切片(金标准) 尚不统一 GeneSearch 组织利用度高、耗时短、客观、标准化、重复性高
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标题: 分析及讨论
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本组病例GeneSearch检测的总体敏感度略低于国外结果, 但与术后连续切片相比无统计学差异(P=0.802) 对微转移的诊断敏感度本组病例显示仅为50%,与术后连 续切片存在一定差距 原因: ①入组SLN阳性癌患者数较少,相应微转移患者数则更少 ②微转移中有2例GeneSearch检测为阴性的CK19的Ct值为30.3和30.2,非常接近其预定分界值30
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标题: 分析及讨论
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DCIS均未出现SLN转移,而伴有微浸润的DCIS出现了2例转移,且转移类型为宏转移 高危的DCIS(肿块直径>3cm、核分级高、粉刺型DCIS) 或伴有微浸润的DCIS 对高危DCIS或DCIS伴有微浸润的患者行SLNB或许是一个明智的选择
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标题: 总结
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GeneSearch用于SLN术中诊断可以达到较满意效果 减轻病理科工作量 有望解决病理诊断标准不统一的现状 但在其临床应用中仍面临一些尚待解决的问题,有待于进一步临床研究数据的支持
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标题: Thank you!