弧菌科常规检验.ppt

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　　标题： 弧菌科常规检验

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　　标题： 弧菌科种类

　　正文： 弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 发光菌属等

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　　标题： 弧菌科共同特征

　　正文： 革兰阴性菌 需氧兼性厌氧 营养要求不高 氧化酶+ 发酵葡萄糖产酸不产气

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　　标题： 弧菌科三个菌属的鉴别

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　　标题： 霍乱弧菌

　　正文： 是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体 包括古典生物型和ElTor生物型 O139是新的流行菌株

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　　标题： 形态染色

　　正文： 革兰阴性 弧形或逗点状 单鞭毛，运动呈“穿梭样”或“流星样” 无芽孢，无荚膜 在新鲜粪便中成“鱼群样”排列

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　　标题： 霍乱弧菌

　　革兰染色

　　鞭毛染色

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　　标题： 培养特性

　　正文： 兼性厌氧 营养要求不高 耐碱不耐酸，常用pH8.4～9.2碱性培养基 在液体培养基中形成菌膜 菌落圆形、较大、扁平

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　　标题： 霍乱弧菌常用培养基

　　正文： 碱性蛋白胨水 碱性琼脂平板 硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(TCBS) 庆大霉素琼脂平板(含亚碲酸钾)

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　　标题： 生化反应

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　　标题： 霍乱弧菌生物型

　　正文： O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生物型 两种生物型具有相同的抗原结构 两种生物型多数生物学性状相似

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　　标题： 霍乱弧菌两种生物型的鉴别

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　　标题： 霍乱弧菌分群、型

　　正文： O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础 根据O抗原不同分为139个血清群 O1群包括古典生物型和ElTor生物型 其他群称为非O1群(非凝集弧菌) O1群血清型(见下表)

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　　标题： 抵抗力与变异

　　正文： ElTor型抵抗力较古典型强， 在水中存活时间长 对酸性物质敏感 对庆大霉素耐受 多次传代可失去典型形态而成为杆状

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　　标题： 临床意义

　　正文： 致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮细胞分泌功能亢进，分泌大量肠液。 所致疾病： 经肠道传染，引起烈性肠道传染病--霍乱，为甲类传染病。 典型病人粪便呈“米泔水”样 病后可获得牢固免疫，以SIgA为主。 我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。

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　　标题： 作用机制示意图

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　　标题： 微生物检验--标本采集

　　正文： 发病早期采集标本 以“米泔水”样便为主，及时送检 卡-布培养基保存 严密包装，专人送检

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　　标题： 检验程序

　　标本

　　增菌培养 碱性蛋白胨水

　　分离培养(TCBS、碱性平板)

　　生化鉴定分型

　　血清学鉴定

　　确诊报告

　　初步报告

　　快速诊断

　　直接涂片 动力、制动试验

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　　标题： 检验方法--显微镜检查

　　正文： 涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注意形态、排列 动力观察：压滴法或暗视野镜检，注意运动方式 制动试验：O1诊断血清与菌体结合，动力消失

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　　标题： 分离培养

　　正文： 标本接种碱性蛋白胨水增菌6～8小时，转种TCBS或庆大霉素琼脂， TCBS：出现黄色菌落 庆大霉素琼脂：出现中心灰褐色的菌落

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　　标题： 鉴定

　　正文： 生化反应：粘丝试验、霍乱红反应 确定血清群：O1群诊断血清与可疑菌落作玻片凝集，以确定是否为O1群 确定血清型：与分型诊断血清作玻片凝集，以确定血清型别 确定生物型： 第Ⅳ组噬菌体裂解试验 多粘菌素B敏感试验 鸡红细胞凝集试验 溶血试验

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　　标题： 副溶血性弧菌--生物学性状

　　正文： 革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽孢，无荚膜 营养要求 不高，嗜盐性，最适盐浓度3.5%NaCl，无盐培养基不生长 TCBS：形成不发酵蔗糖的绿色菌落 神奈川现象+：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔红细胞，不溶解马红细胞

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　　标题： 副溶血性弧菌--临床意义

　　正文： 致病物质：溶血素(耐热直接溶血素和耐热相关溶血素) 所致疾病： 食入副溶血性弧菌污染的盐腌食品，引起食物中毒

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　　标题： 气单胞菌属

　　正文： 形态染色： 革兰阴性杆菌，或球杆状、丝状，极端鞭毛，无芽孢 生长条件： 兼性厌氧;营养要求不高 生长温度较宽，0℃～45℃ 嗜冷菌37℃以下生长 嗜温菌10～42℃生长

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　　标题： 气单胞菌属

　　正文： 生长现象 TCBS上不生长 血平板：灰白、光滑、凸起菌落 肠道选择平板：形成不发酵乳糖菌落 生化反应 氧化酶+、触酶+ 发酵葡萄糖产酸产气 6.5%NaCl不生长 O129不敏感 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药

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　　标题： 气单胞菌属--临床意义

　　正文： 致病物质：溶血毒素、细胞毒素 所致疾病： 肠道感染：是夏季腹泻常见病原菌 肠外感染：败血症、伤口感染等 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药

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　　标题： 检验程序

　　标本

　　增菌

　　分离培养 (血平板、Mac)

　　全面生化反应

　　可疑菌落

　　肠毒素测定

　　初步生化反应

　　涂片 染色镜检

　　血标本

　　氧化酶 TCBS生长 O/129 耐盐试验

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　　标题： 鉴定试验

　　正文： 与肠道杆菌、非发酵菌鉴别 与邻单胞菌属和弧菌属鉴别 气单胞菌属种间鉴别

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　　标题： 肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别

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　　标题： 鉴定依据

　　正文： 革兰阴性杆菌，丛鞭毛 肠道选择平板上无色透明菌落 氧化酶+、葡萄糖发酵+ O/129：R TCBS：- 6.5%NaCl：-

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　　标题： 邻单胞菌属--主要性状

　　正文： 只有一个菌种：类志贺邻单胞菌 革兰阴性杆菌，单鞭毛或丛鞭毛，无芽孢，无荚膜 兼性厌氧，营养要求不高 在SS平板形成不发酵乳糖菌落 氧化酶+，葡萄糖发酵+ O/129：S TCBS：不生长 6.5%NaCl：不生长 赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸双水解均+ 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药

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　　标题： 邻单胞菌属--临床意义

　　正文： 腹泻、食物中毒，多见于夏季 败血症、脑膜炎等，多见于免疫力低下者，感染率低，但死亡率高。

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　　标题： 邻单胞菌属--检验程序

　　标本

　　增菌

　　分离培养 (血平板、Mac)

　　全面生化反应

　　可疑菌落

　　初步生化反应

　　涂片 染色镜检

　　血标本

　　氧化酶 TCBS生长 O/129 耐盐试验

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　　标题： 邻单胞菌属--鉴定

　　正文： 与志贺菌属鉴别：氧化酶、动力、血清学 与气单胞菌属鉴别：O/129，肌醇试验 与弧菌属鉴别：TCBS、6.5%NaCl生长试验