细胞培养.ppt

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　　标题： 细胞培养

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　　标题： 细胞培养的优点

　　正文： 1.活细胞：能长时间、直接观察、研究 活细胞的形态、结构、生命活动

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　　正文： 2.可控制：可控制-选择对象：均一性、重复性 哪一种：类型：上皮?间质?-- 性质：正常?肿瘤?-- 阶段：可控制-调节条件：各种因素 物理、化学、生物等因素

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　　正文： 可控制-利用方法： 采用各种研究技术、记录方法： 研究：倒置生物显微镜、荧光显微镜、 电子显微镜、流式细胞术、激光共焦  显微镜、免疫组织化学、原位杂交、 同位素标记-- 记录：摄影照片、缩时电影、电视--

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　　正文： 优点3.应用广：  学科多： 对象广： 各种动物：低等动物--高等动物--人类 一种动物：不同年龄-- 不同组织-- 正常或异常(肿瘤--)

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　　正文： 4.较经济：可提供大量、同时、重复性好的、 生物学性状相似的实验对象

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　　标题： 细胞培养的缺点

　　正文： 现人工模拟体内环境的技术已经很高,  但, 人工所模拟的条件与体内实际情况 仍不完全相同. 当细胞被置于体外培养后, 生活在缺乏动态平衡的环境中, 久了，必然发生变化.

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　　正文： 1.与体内主要不同 相对孤立、相对单一 缺乏体内的系统作用、失去神经体液的调节 和细胞相互间的影响

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　　正文： 2.主要表现 失去原有组织结构和细胞形态 分化减弱或不显 细胞趋向单一化; 3.提示 要正确认识体外培养细胞 是一种特定条件下生长的细胞群体。

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　　标题： 生长类型

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　　标题： 体外细胞培养物的生长类型

　　正文： 按生长方式:2型 粘附型细胞:附着在某一固相支持物表面才  能生长的细胞。 悬浮型细胞:不必附着于固相支持物表面，而 在悬浮状态下即可生长的细胞。 绝大多数有机体细胞属粘附型细胞， 只有少数细胞类型如某些肿瘤细胞和白细胞 可在悬浮状态下生长

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　　标题： 贴附(粘附)型细胞

　　正文： 粘附:是大多数有机体细胞在体内 生存和生长发育的基本存在方式 含义 两方面 结果 基于粘附特性，使细胞与细胞之间相互结合形成组织， 有机体的绝大多数细胞必须 粘附于一固相表面 才能生存和生长。

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　　正文： 培养时：这些细胞被放到体外环境中以后,同样需要粘附于某一固相表面才能生存和生长，因而属于粘附型细胞。 粘附(锚定或锚着)依赖型(性)细胞：唯有粘附于固相表面才能生存的细胞

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　　正文： 类型 细胞在体内、外的粘附方式：存在差异 体内：粘附是全方位 外形具有复杂的立体特征 体外：多数情况，细胞只有一个附着平面 外形一般与体内时明显不同 按照培养细胞的主要形态，可分为几大类型

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　　正文： 分类 根据形态大致的不同，主要2类： 上皮样 成纤维细胞样 其它，不定型

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　　标题： 上皮样细胞型

　　正文： 名称：仅形态上似体内，实际上不完全等于-- 来源：来源于外胚层，内胚层细胞 如：皮肤及其衍生物 消化道，乳腺，肺泡 上皮性肿瘤 形态：类似体内的上皮细胞 扁平，不规则多角形，中有圆形核

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　　正文： 生长特点 易相连成片 相靠—紧密相连—成薄层—铺石状 生长时呈膜状移动 很少脱离细胞群而单个活动

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　　标题： 成纤维细胞样细胞

　　正文： 名称：凡在培养中形态与成纤维细胞类似的 来源：由中胚层间充质组织起源的组织 如：真正的成纤维细胞 心肌，平滑肌，成骨细胞，血管内皮 形态：似体内成纤维细胞的形态 胞体梭形或不规则三角形 胞质向外伸出2—3个长短不等的突起 中有卵圆形核

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　　正文： 生长特点 排列成放射状，漩涡状 并不紧靠连成片， 细胞—细胞接触易断开而 单独行动 游离的单独的成纤维样细胞， 常有几个伸长的细胞突起

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　　标题： 贴附生长型--类型

　　正文： 1. 与体内同名的细胞不完全相同 如：形态相似的成纤维细胞，可不同来源 自同一动物不同组织的成纤维样细胞相似但 发展趋向不同 2. 培养细胞的形态不稳定 条件改变，细胞形态可有变化

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　　正文： 培养细胞形态不稳定血清 Hela 高血清 低血清 成纤维细胞样 上皮样细胞pH Hela 太酸或太碱 标准pH 成纤维细胞样 上皮样细胞细胞密度 3T3 低密度 高密度 成纤维细胞样 上皮样细胞 生长状态改变 悬浮或贴附 悬浮 贴附 圆形 成纤维或上皮样转化与否 未转化 转化后 成纤维样 可成上皮样

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　　标题： 悬浮生长型

　　正文： 概念 培养时不贴附于底物而呈悬浮状态生长 或以机械方法使保持悬浮状态下生长 来源 自血，脾或骨髓， 尤以血中白细胞 癌肿细胞也可能 特点 在悬浮中生长良好 细胞圆形，单个或小细胞团

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　　正文： 优点 生存空间大，提供数量大 传代方便(不需消化) 易于收获 可获得稳定状态 缺点 观察不方便 很多细胞不能悬浮生长(尤以正常细胞)