酶学方法.ppt

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　　标题： Methods in Enzymology酶学方法(丛书)

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　　一、《酶学方法》丛书概览

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　　标题：

　　其他占位符：始创于1955年，迄今已经有60年的历史。卷1 - Preparation and Assay of Enzymes(酶的制备与检测)，这也是该丛书取名叫《酶学方法》的原因。从创刊至今，涉及的领域和内容一直在扩大和更新，介绍的话题并不只限于酶学，而是逐渐扩展到生命科学领域的各个研究方向每一个主题既包含经典的背景知识介绍，同时又会包含具体的研究技术以及详细的实验操作步骤拥有50,000多个编辑和投稿者，其中有很多是诺贝尔奖获得者是ScienceDirect上引用率和下载量最多的丛书

　　1. 历史悠久，内容权威

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　　这不是一本仅仅介绍酶学的书，而是覆盖了生命科学的各个分支学科的系列丛书

　　(Gp:) 生命科学

　　(Gp:) 生物化学

　　(Gp:) 分子生物学

　　(Gp:) 细胞生物学

　　(Gp:) 结构生物学

　　(Gp:) 基础医学

　　(Gp:) 微生物学

　　(Gp:) 植物学

　　(Gp:) 遗传发育学

　　(Gp:) 纳米医学

　　(Gp:) 系统生物学

　　(Gp:) 合成生物学

　　(Gp:) 环境微生物学

　　(Gp:) 生物光子学

　　(Gp:) 氧化还原生物学

　　(Gp:) 神经学

　　(Gp:) 晶体学

　　(Gp:) ………

　　《酶学方法》是生命科学领域的研究人员基本而必备的参考资源

　　2. 覆盖领域广

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　　酶只是《酶学方法》丛书中的主题之一，是所涵盖的所有主题的冰山一角

　　DNA,RNA，核小体，染色质蛋白质(包括很多具有催化功能的酶) 碳水化合物，糖生物学，脂质，氨基酸维生素&激素，干扰素，生长因子嘌呤和嘧啶核苷酸的代谢，抗体，淀粉样蛋白，朊病毒 G蛋白偶联受体，信号分子及关键的信号蛋白泛素和蛋白降解，分子伴侣，蛋白质折叠活性氧自由基，巯基黄酮多酚类，类固醇和萜类化合物，细胞色素神经递质血红蛋白，血小板细胞膜，离子通道，线粒体，核糖体细胞骨架，细胞外基质 ………………………………..

　　3. 介绍主题多

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　　介绍了生命科学领域涉及到的各项技术

　　酶的分离纯化，亲和标记，酶动力学机理转基因，真核系统中基因的重组表达，RNA干扰，基因芯片，基因治疗生物大分子结晶，生物大分子的测序分析，细胞培养免疫化学细胞信号转导研究技术活体细胞的成像和光谱技术，核磁共振，激光显微捕获，共聚焦显微技术基因组学，转录组学，蛋白组学，代谢组学，功能糖组学高效液相色谱，质谱计算机模拟，药物设计，药物核酸相互作用，蛋白质-蛋白质相互作用小鼠发育生物学研究技术天然产物的生物合成干细胞和组织培养技术重要疾病的研究如：癌症，糖尿病 …………………………….

　　4. 包含各种相关实验操作指南

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　　每年都会出版十几个卷册，及时捕捉和总结生命科学领域的新近研究内容及研究技术从2015年1月1号到今天为止，就已经出版了7卷。从这本书中可以获得一站式服务的体验，包括背景知识以及研究技术和详细操作指南便于研究者用最短的时间获得相关话题最全面最权威的信息。

　　5. 还在持续更新和补充出版中……

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　　二、经典卷册案例介绍

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　　Culture cells in vitro simulating in vivo environment

　　案例一：Volume 58 - Cell Culture 细胞培养

　　cell culture medium

　　cell culture incubator

　　Cell culture dish

　　Pipette

　　Sterile work table

　　Microscope

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　　(Gp:) Biology

　　(Gp:) Drug development

　　applications

　　(Gp:) 细胞培养的应用非常广泛生物化学家感兴趣的很多问题都可以通过细胞培养而获得相应的答案

　　案例一：Volume 58 - Cell Culture 细胞培养

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　　Part 1

　　Part 2

　　Part 3

　　该卷册分为三大部分，满足了科研人员对于细胞培养知识的一般需求和特殊需求

　　介绍细胞培养的工具和基本方法

　　细胞培养基的选择抗生素的使用细胞的生长条件细胞的储存和运输细胞污染的检测实验室细胞培养的管理及安全防范 …………………..

　　介绍特别有用的特殊的细胞培养技巧

　　人工血管的组织培养干扰素的诱导和生产细胞转化细胞融合细胞生长产物的收集哺乳动物细胞的大规模培养流式细胞术通过细胞转化检测化学品的致癌性 ………………..

　　介绍了针对不同细胞类型的具体培养方法

　　骨骼肌细胞干细胞成纤维细胞黑色素细胞小鼠白血病细胞肾上腺皮质细胞大规模制备软骨细胞巨噬细胞交感神经元细胞的分离和培养 ……………………

　　案例一：Volume 58 - Cell Culture 细胞培养

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　　案例二：Volume 101 - Recombinant DNA 重组DNA

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　　其他占位符： genetically-modified organism

　　GMO

　　案例二：Volume 101 - Recombinant DNA 重组DNA

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　　重组DNA技术使得研究人员解决复杂性的生物学问题的方法发生了革命性的变化，利用这一技术可以在医药，农业，工业领域生产出新的，更好的产品。时下备受争论的热点话题转基因食品(GMO)所应用的核心技术就是DNA重组《酶学方法》中关于DNA重组的卷册讲述了DNA分离，杂交，克隆，突变，基因产物的分离方法以及基因克隆的不同载体系统，比如在酵母细胞中进行基因的克隆等等。 Volume100,101,153,154,155-Recombinant DNA 都是关于重组DNA的介绍。其中Volume 101的投稿者包括诺贝尔奖得主Sidney Brenner(2002年诺贝尔生理学/医学奖)和 Andrew Fire(2006年诺贝尔生理学/医学奖)。《酶学方法》中几乎有20卷是关于DNA的内容，关于这方面内容的卷册还将根据研究动态实时增加。

　　案例二：Volume 101 - Recombinant DNA 重组DNA

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　　(Gp:) Pick up mono clone

　　(Gp:) 37℃ overnight

　　(Gp:) Expand culture to 2L

　　(Gp:) Chromatography

　　(Gp:) Centrifuge

　　(Gp:) Ultrasonic

　　案例三：Volume 152 - Guide to Molecular Cloning Techniques 分子克隆

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　　随着重组DNA技术的发展，核酸生物化学和分子生物学进入了一个快速发展的时代，对于生命科学领域的研究人员来说，尽管大家的研究方向不尽相同，但是分子克隆技术着实给研究人员提供了很多的方便。分子克隆涉及复杂而繁多的信息，但该卷布局非常条理清晰。首先介绍了DNA重组技术的基本技巧，同时紧跟着一系列的章节，每一章节会解决一个实验过程中通常会遇到的问题。既能满足初次接触分子生物学领域新人的需求，同时也为该领域中有一定经验的研究人员提供非常有价值的信息和操作指南。

　　案例三：Volume 152 - Guide to Molecular Cloning Techniques 分子克隆

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　　Purified protein

　　案例四：Volume 182 - Guide to Protein Purification 蛋白质分离纯化

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　　DNA经过转录和翻译最终生成蛋白质，蛋白质是基因功能的执行者和生命活动的体现者。随着生命科学的发展，越来越多的问题需要上升到蛋白的水平上来进行研究，而且有很多的具有催化功能的蛋白质是酶，对这些蛋白质或酶的研究就需要得到它们的纯化物。 2010年，在Richard Burgess和原编辑Murray Deutcher的组织下，该卷在之前相关卷册的基础上增加了新的内容和研究技术

　　蛋白质纯化方法及注意事项

　　研究蛋白质结构和功能的关键技术

　　蛋白质的纯化技术，溶液的配置酶活性的测定，蛋白质的定量及纯度检测蛋白质稳定性的保持在E.coli以及真核细胞中进行蛋白过表达的策略细胞器的分离膜蛋白的可溶性，膜蛋白的纯化，糖蛋白的纯化，多酶复合物的纯化离子交换层析，凝胶过滤，亲和层析，高效液相层析蛋白质的电泳及二维电泳，胶内回收蛋白组成蛋白质的氨基酸分析蛋白质修饰的分析蛋白质结晶单/多克隆抗体的制备，蛋白质的免疫检测，免疫共沉淀蛋白质的放射性标记通过计算机分析蛋白质的三维结构等。

　　Volume 182

　　案例四：Volume 182 - Guide to Protein Purification 蛋白质分离纯化

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　　离子通道由细胞产生的特殊蛋白质构成，它们聚集起来并镶嵌在细胞膜上，中间形成水分子占据的孔隙，这些孔隙就是水溶性物质快速进出细胞的通道。离子通道是目前很多处方药调控的重要靶点。

　　案例五：Volume 207 - Ion Channels 离子通道

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　　诺贝尔奖得主Erwin Neher(1991年诺贝尔生理学/医学奖)，致力于《酶学方法》中这一卷的撰写。该卷对离子通道的讲述包括：

　　离子通道蛋白的克隆表达，纯化膜离子通道重建技术电生理与膜片钳技术等等

　　该卷不仅对细胞膜方面的研究人员有用，而且为细胞生物学，生物化学，分子生物学，药理学以及微生物学方面的研究人员提供非常有用的离子通道方面的信息。

　　案例五：Volume 207 - Ion Channels 离子通道

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　　干细胞具有分化成机体其它各组织的能力，因此引起生命科学领域以及临床领域研究人员的极大的兴趣。干细胞可用于器官移植以及再生医学。

　　干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞

　　案例六：Stem Cells 干细胞

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　　早在2003年《酶学方法》中Volume 365-Differentiation of Embryonic Stem Cells 胚胎干细胞的分化一卷中就介绍了干细胞的相关知识。 2006年-2007年又陆续出版了三卷分别是： Volume 418-Embryonic Stem Cells 胚胎干细胞 Volume 419-Adult Stem Cells 成体干细胞 Volume 420-Stem Cell Tools and Other Experimental Protocols 干细胞工具和相关的实验指南这几个卷册以短小精悍的review的形式介绍了胚胎干细胞，成体干细胞以及干细胞研究技术和组织工程。同时紧接着会提供一套相应的实验操作指南，实验指南介绍的非常清晰易懂，即使是没有经验的研究人员也能很快地在实验室中建立这套技术。

　　案例六：Stem Cells 干细胞

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　　《酶学方法》有很多卷册是专门介绍实验方法和具体操作指南的如： Volume 529-Laboratory Methods in Enzymology: DNA Volume 530- Laboratory Methods in Enzymology: RNA Volume 533- Laboratory Methods in Enzymology: Cell, Lipid and Carbohydrate Volume 536&539&541-Laboratory Methods in Enzymology: Protein Volume 537&538 - Methods of Adipose Tissue Biology ……………………………………………………………….

　　案例七：专门介绍实验操作指南的卷册

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　　详细的实验操作步骤缓冲液和试剂的配方实验操作流程表和图片有些还会有Video来展示实验操作的关键步骤这些实验指南不仅适用于刚接触该领域的本科生，同时也经验丰富的研究生，博士，博士后等研究人员

　　案例七：专门介绍实验操作指南的卷册

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　　三、逻辑清晰的组织结构和友好的使用平台

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　　每一卷册聚焦某一个研究领域或者研究话题每一个卷册根据具体话题通常包含20-25篇文章

　　有很多文章可以独立地给我们提供相关的信息，并不需要阅读整个的卷册，极大的节省了科研人员的时间

　　使用平台：ScienceDirect 网址：www.sciencedirect.com

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　　组织结构：每一个chapter就是一篇文章