第三章 自动血凝仪的检测原理.ppt

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　　自动血凝仪(automated coagulation analyzer)的检测原理

　　第三章

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　　(一)凝固法

　　(Gp:) 定量加取试剂、提供37±0.5℃的反应温度

　　(Gp:) 血浆

　　(Gp:) 血浆凝固(反应终止)

　　(Gp:) 试剂

　　(Gp:) 反应槽

　　用于测定血浆凝固时间

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　　(Gp:) 散射比浊：散射光强度 透射比浊：吸光度大小

　　1. 比浊法

　　(Gp:) →均增大

　　2. 电流法(钩法)

　　3.磁珠法(粘度法)

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　　(二)生物化学法：

　　(Gp:) (过量)产色物质-底物 + 酶 →→ 产色物质(显色)

　　(Gp:) 水解

　　1. 酶(活化凝血因子)的检测：

　　用于测定凝血因子(酶原)、活化凝血因子(酶)及酶抑制物(AT 、抗纤溶酶)的活性。

　　产色物质：对硝基苯胺(PNA)，游离PNA呈黄色，测定波长405nm。

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　　2. 酶原(凝血因子)的检测：

　　3. 酶抑制物的检测：

　　(Gp:) (过量)激活剂 + 酶原 ↓ (过量)产色物质-底物 + 酶 →→ 产色物质(显色)

　　(Gp:) 水解

　　(Gp:) 酶抑制物 +(过量、定量)酶 ↓ (过量)产色物质-底物 +(剩余)酶→→产色物质(显色)

　　(Gp:) 水解

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　　(三)免疫学方法

　　1.透射比浊法 2.散射比浊法 3.胶乳比浊法

　　(Gp:) 抗原 + 抗体 → 抗原抗体复合物

　　(Gp:) 浊度增加

　　(Gp:) 散射光、吸光度增加

　　(Gp:) 胶乳颗粒

　　用于检测凝血因子、酶抑制物的含量。

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　　凝血功能检测试验的检测前质量控制：

　　★停用有影响的药物一周以上(抗凝治疗监测者除外) ★抗凝剂：109mmol/L的枸橼酸钠;抗凝比：1︰9 ★止血带使用时间要短，采血应顺利，无凝血、溶血 ★容器：真空采血管、塑料管、硅化玻璃管及注射器 ★标本储存：4～10℃，<2h;(常温、不超过2h)

　　凝血功能检测试验的检测前质量控制：

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　　凝血弹性图仪

　　第四章

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　　凝血弹性图(Thrombelastography, TEG)

　　一、TEG凝血弹性描记仪(Thrombelastograph?Coagulation?Analyzer，TEG)

　　一种能够动态监测整个凝血过程的分析仪。主要用于对凝血和纤溶全过程及血小板功能进行全面检测(特别是术中能简化凝血功能障碍的诊断)，并指导成份输血。

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　　1948年由德国人Harter发明 1980年代，开始广泛用于临床指导术中输血取得了良好效果，现已成为当今围术期监测凝血功能的最重要指标。 1995-1996年，开始在心脏外科使用。目前以TEG为主要监测手段的体外循环术中凝血监测方案已经在世界上40多个国家使用。

　　二、凝血弹性图仪的历史：

　　2004年，抗血小板药物疗效监测的血小板图试验—PlateletMapping上市，为临床带来了快速、准确的监测血小板聚集功能的技术。

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　　三、凝血弹性图仪的原理：

　　承载血标本的测试杯以4°45'的角度和每10秒一周的速度均速转动，一旦血栓形成，置于血标本检测杯中的金属探针受到标本形成的切应力作用，随之出现左右旋动，金属针在旋动过程中由于切割磁力线而产生电流，给电脑软件处理后，便形成TEG曲线。

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　　五、凝血弹性图的参数：

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　　(一)R时间 1、从检测开始到第一块纤维蛋白凝块形成之间的一段潜伏期，是凝血因子依次激活的时间，反映凝血因子(Fg除外)与血小板PF3的活性。 2、R时间因使用抗凝剂或凝血因子、血小板异常而延长，因血液呈高凝状态而缩短。

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　　(二)K时间 (R+K正常为10~12min) 1. 从R时间终点至描记图幅度达20mm所需的时间; 2. 主要与Fg、其它凝血因子和PF3活性有关，抑制它们活性的抗凝剂能延长K 。

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　　(三)α角度 1. 从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与水平线的夹角，正常为50°~ 60° 。 2. α角度与K时间密切相关，影响因素相同。 3. α角度不受极其低凝状态的影响，较K时间更全面

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　　(四)A(A30) 1、是任一时刻曲线两点间的扫描宽度，是血凝块强度或弹性函数，A值用单位mm来计量; 2、MA值在确定前与A值相等; 3、MA值确定后A值测量血凝块溶解的信息。

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　　(五)最大幅度MA 1. 正常值为50~60mm。 2. MA反映了正在形成的血凝块的最大强度或硬度及血凝块形成的稳定性; 3. 主要受PLT及Fg 、FⅩⅢ活性的影响， PLT的作用要比Fg大。

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　　(六)TMA时间(time to MA) 1. 从凝血开始至MA值确定所需用的时间 2. TMA包含血凝块的形成速率，评估形成稳定血凝块所需用的时间。

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　　(七)CL30 1. 测量在MA值确定后30分钟内血凝块溶解剩余的百分比。 2. CL30=(A30/MA)× 100% 3. CL30<85%意示处于高纤溶状态，即纤溶亢进;应使用抗纤溶药来纠正。

　　(八)LY30 1. MA值后30分钟血凝块幅度减少的区域面积; 2. LY30>7.5% 意示处于高纤溶状态，应使用抗纤溶药来纠正。

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　　LY30上=85%

　　LY30下=15%

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　　(九)TTL 1、TTL = Time to lysis 溶解时间 2、指从MA确定后，曲线幅宽收窄至2mm时所经过的时间

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　　(Gp:) 高岭土

　　(Gp:) 高岭土

　　ACT

　　其它凝血因子 + PF3

　　凝血因子+PF3+Fg

　　Fb+FⅩⅢ+PLT

　　Fb+FⅩⅢ+PLT

　　纤溶期

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　　参数写法与参考值

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　　正常TEG图

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　　凝血因子缺乏与低Fg的TEG

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　　高凝状态TEG

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　　纤溶亢进TEG

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　　TEG检测与常规实验室检测的区别