医学微生物学 各论 第二十四章 人类疱疹病毒.ppt

　　xx医学院病原生物学教研室

　　Medical Microbiology

　　医 学 微 生 物 学

　　病 原 生 物 学

　　医学微生物学 各论

　　第二篇 病毒学各论 第24章 人类疱疹病毒

　　共同特点

　　1.形态、结构：球形，有包膜，dsDNA病毒，直径 120-200nm，162个壳粒组成，20面体立体对称; 2.复制：除EBV及HHV-6和HHV-7外，均可在2倍体细胞增殖;产生明显CPE;核内有嗜酸性包涵体;病毒可通过细胞间桥直接扩散;感染C、未感染C融合成多核巨C。 3.多种感染方式： 显性感染、 潜伏感染、整合感染和先天性感染

　　第一节 单纯疱疹病毒

　　Herpes simplex virus

　　典型的疱疹病毒科病毒的形态学特征 球形，120-150nm，双链线状DNA，衣壳是20面立体对称 分型：2个血清型：HSV-1、HSV-2 包膜：多种糖蛋白：至少11种： gB，gD — 吸附有关; gD — 诱导中和Ab作用最强; gG—HSV-2型特异; gC—HSV-1型特异; 培养： 易感动物：家兔、豚鼠、小鼠、鸡胚; 易感细胞：兔肾、人胚肺、人胚肾、人羊膜细胞

　　一、生物学性状

　　二、致病性与免疫性

　　1、传染源：患者、健康带毒者 2、传播途径： HSV-1：密切接触、呼吸道、胎盘 HSV-2：性接触、产道 、皮肤、口腔、 呼吸道、破损皮肤 3、感染方式： 机体 绝大多数：隐性感染; 少数：皮肤粘膜局部疱疹; 极少数：全身性感染，死亡;

　　4、感染类型：

　　HSV1：疱疹性龈口炎、湿疹、甲沟炎、 角膜结膜炎、脑炎 潜伏：三叉神经节、颈上神经节 HSV2：生殖器疱疹 潜伏：骶神经节潜伏

　　(1)原发感染：多见隐性感染

　　(2)潜伏感染和复发:

　　HSV-1,2→神经节→病毒激活→神经纤维 ↓ 复发性局部疱疹←皮肤粘膜 ↓ HSV-1：最多见口唇部疱疹 HSV-2：最多见生殖器疱疹

　　(3)先天性感染：

　　HSV-1：胎盘→胎儿流产，早产， 死胎，先天畸形 HSV-2：产道感染→新生儿疱疹

　　HSV-2感染与子宫颈癌的发生有密切关系。其根据是：　　①患过生殖器疱疹的妇女，宫颈癌的发病率高;　　②宫颈癌患者抗HSV-2抗体阳性率高，效价也高;　　③用免疫荧光检查子宫颈癌脱落细胞涂片可在细胞中查到 HSV-2抗原;　　④HSV-2作用于地鼠胚成纤维细胞培养可引起细胞转化，将转 化细胞注射地鼠可诱生肿瘤;　　　⑤宫颈疱疹与宫颈癌好发部位相似，都在鳞状上皮和柱状上 皮交界处;　　　　　　⑥分子杂交试验证明宫颈癌细胞中有HSV-2的基因片断并有特 异性mRNA存在。

　　(4)HSV-2与子宫颈癌的关系

　　(5)免疫性

　　原发感染后1周左右血中可出现中和抗体3-4周达高峰，可持续多年 细胞免疫起更重要作用

　　病毒的分离与鉴定

　　三、微生物学检查

　　分离HSV较易成功。 采取水疱液、唾液、角膜试子或刮取物、阴道棉拭子等接种于兔肾、人胚肾等易感细胞进行培养。一般2-3d即出现CPE，特点是细胞肿胀、变圆、相互融合等，据此可初步判定。 单克隆抗体间接免疫荧光染色法以及DNA酶切分析等方法进行鉴定或分析。

　　微生物学检查

　　用电镜直接检查水疱液中的病毒颗粒; 用免疫荧光技术、免疫酶染色等观察细胞内特异性抗原。 在标本接种细胞后，在出现细胞病变之前，做免疫荧光或免疫酶染色进行快速诊断; 用核酸杂交或PCR方法检测标本中HSV病毒核酸进行诊断。

　　快速诊断

　　血清学诊断：　　 可用于HSV血清学诊断的试验有IFA及ELISA等。 IgG抗体在体内持续时间长，不宜作为临床诊 断，而主要用于血清流行病学调查，以了解HSV在人群中的感染率。 IFA的优点在于可测出IgM、IgG或IgA型抗体。 ELISA测HSV抗体敏感性可达95%。

　　微生物学检查

　　尚无特殊方法。 因HSV与癌症的发生可能有关，故一般不主张使用活疫苗或含有疱疹病毒DNA的疫苗。用gD制备亚单位疫苗正在研究中。 如孕妇围产期产道有HSV-2感染，可进行剖腹产或对新生儿注射丙种球蛋白做应急预防。 

　　四、防治原则

　　(一)预防

　　用5-碘脱氧尿嘧啶核苷(疱疹净)、阿糖胞苷(Ara-A)等治疗疱疹性角结膜炎有一定疗效。 此外，近年发现无环鸟苷 (acyclovir,ACV) 及其衍生物脱氧鸟苷(VACV)可选择地抑制HSV的复制，能缩短病程、减轻病状，且毒性较低，临床已用于治疗口唇疱疹、疱疹性脑炎、生殖器疱疹等。但不能防止潜伏感染再发。 单独使用IFN对树枝状疱疹性角膜炎也有治疗效果，如与上述药物合用则效果更为显著。

　　防治原则

　　(二)治疗

　　第二节 水痘带状疱疹病毒

　　Varicella-zost virus VZV

　　概述

　　人是VZV的唯一自然宿主。 皮肤是病毒的主要靶细胞。 可由同一种病毒引起两种不同的病症。 儿童初次感染引起水痘。 潜伏体内的病毒受到某些刺激后复发引起带状疱疹，多见于成年人和老年人。

　　一、生物学性状

　　似HSV 只一个血清型 对一般实验动物不敏感，在人胚成纤维细 胞中增殖，并缓慢产生细胞病变

　　二、致病性

　　传染源：患者(唯一天然宿主) 患者急性期水疱内容物及上呼吸道分泌物 带状疱疹水疱内容物 传播途径： 呼吸道传播 接触传播

　　(一)原发感染：水痘(Chicken Pox)

　　病毒

　　经呼吸道、结膜、皮肤等处侵入人体

　　先在局部淋巴结增殖

　　进入血液散布到各个内脏继续大量增殖

　　2～3周潜伏期，再次入血

　　皮肤广泛发生丘疹，水疱疹和脓疱疹

　　儿童：斑丘疹, 水疱疹, 脓疱疹，偶见并发症 孕妇：较严重重, 可致胎儿畸形, 流产, 死产 免疫低下患者：重症水痘

　　(二)潜伏感染和再发感染：带状疱疹

　　儿童时期患过水痘愈合

　　病毒潜伏在脊髓后根神经节或脑感染神经节中

　　机体免疫力下降等条件刺激

　　病毒沿感觉神经轴索下 行

　　该神经所支配的皮肤 细胞内增殖

　　在皮肤上沿着感觉神经的通路发 生串联的水疱疹，形似带状

　　免疫力低下的成人和老人多见

　　zoster

　　三、微生物检查及防治

　　水痘一带状疱疹的临床症状典型，一般不需作微生物学诊断。 VZV减毒活疫苗预防水痘感染和传播有良好效果。 治疗可用无环鸟苷、阿糖腺苷和高剂量干扰素。

　　第三节 巨细胞病毒

　　(Cytomegalovirus，CMV )

　　概述

　　感染的细胞肿大，并具有巨大的核内包涵体，故名。 CMV具有典型的疱疹病毒形态，其DNA结构也与HSV相似。

　　一、生物学性状：

　　有三种颗粒：典型颗粒、致密颗粒、包膜颗粒 具备典型的疱疹病毒的形态结构 直径180-250nm，有包膜 线状双股DNA 种属特异性高：只感染人 复制周期长，增殖缓慢 CPE：细胞肿胀，核变大，形成巨细胞，核内/胞浆内嗜酸性包涵体 ， “猫头鹰眼”状包涵体。

　　嗜酸性包涵体

　　“猫头鹰眼”状包涵体

　　二、致病性与免疫性

　　传染源： 患者 无症状的隐形感染者 传播途径： 密切接触：日常接触、性接触、早期哺乳等 输血 器官转移等 感染类型 原发感染：2岁以下常隐性感染(成人60-90%有抗体) 潜伏感染：唾液腺、乳腺、肾脏、白细胞及其它腺体，与其它疱疹病毒不同之处——始终排毒(以上分泌物中)

　　感染类型 先天性感染： 胎盘→先天感染→先天畸形 重者流产，死产 围产期感染：产道→新生儿感染，哺乳 免疫功能低下者感染：再发感染→严重感染(致死性疾病)间质肺炎、视网膜炎、食管炎、结肠炎、脑膜脑炎等 输血感染：输血后单核细胞增多症，肝炎 接触感染：接吻、性接触、哺乳 与肿瘤关系： 宫颈癌 前列腺癌 结肠癌 Kaposi肉瘤

　　三、 微生物学检查

　　细胞学检查： 多核巨细胞 典型的包涵体 病毒分离：接种到人胚肺成纤维细胞 查核酸：PCR、杂交 血清学 ELISA查IgM抗体， 宫内感染

　　四、治疗与预防

　　治疗： 丙氧鸟苷(ganciclovir GCV)有防止CMV扩散作用 耐丙氧鸟苷的CMV感染可选用磷甲酸，但效果比前者差 预防： CMV病毒活疫苗致癌潜能的问题有待解决 CMV包膜糖蛋白的亚单位疫苗是研究的方向

　　第四节 EB病毒

　　(Epstein-Barr virus，EBV )

　　概述

　　Epstein和Barr于1964年首次成功地将Burkitt非洲儿童淋巴瘤细胞时发现，故名。 为一种嗜B淋巴细胞的疱疹病毒，结构与其它疱疹病毒相似。 不能用常规方法培养。 主要侵犯B细胞。

　　一、生物学性状

　　形态结构与其他疱疹病毒相似。 病毒直径150-180nm。 核心为双链线状DNA，长约173kb。 衣壳由162个壳粒排列成二十面体构成。 有包膜。

　　EBV特异性抗原

　　1、潜伏感染： EBV核抗原(EBNA)：有6种，感染和转化的B细胞核内均可检出 潜伏感染膜蛋白(LMP ) ：潜伏感染B细胞的表面抗原 LMP1 LMP2 2、增殖性感染： 早期抗原(EA )：非结构蛋白，具DNA多聚酶活性 衣壳抗原(VCA)：与病毒DNA组成EBV的核衣壳 膜抗原(MA)：EBV的中和抗原(gp320)

　　二、致病性与免疫性

　　EB病毒在人群中广泛感染。 我国3～5岁儿童感染率达90%以上。 主要通过唾液传播，也可经输血传染。 EB病毒在口咽部上皮细胞内增殖，然后感染B淋巴细胞。 感染B细胞进入血循环可造成全身性感染。 病毒可长期潜伏。

　　传染源：患者、隐性感染者 传播途径：唾液传播，偶尔输血感染 感染类型： 增殖性感染： 初次感染：幼儿隐性感染多见。 青春期原发性感染：50%引起传染性单核C增多症 非增殖性感染：潜伏感染→引起细胞转化→恶性转化

　　1、传染性单核细胞增多症

　　一种急性淋巴组织增生性疾病，多见于青春期初次感染EBV后发病。 三个典型症状为发热、咽炎和颈淋巴结肿大。 随病情发展可出现肝脾肿大、肝功能异常，外周血单核细胞增多，并出现异型淋巴细胞(可杀伤表面有EBV抗原表达的B细胞)

　　所致疾病

　　2、非洲儿童淋巴瘤(即Burkitt淋巴瘤)

　　于中非、新几内亚和美洲温热带地区呈地方性流行。 多见于5～12岁儿童。 好发部位为颜面、腭部。 所有BL病人血清均含EBV抗体，其中80%以上滴度高于正常人。 在肿瘤组织中发现EBV基因组。

　　3、鼻咽癌

　　我国南方(广东、广西)及东南亚是鼻咽癌高发区。 多发生于40岁以上中老年人。 EBV与鼻咽癌 在所有病例的癌组织中有EBV基因组存在和表达。 病人血清中有高效价EBV抗原(主要VCA和EA)的lgG和 lgA 抗体病情好转后，这些抗体的滴度也随之下降。

　　三、微生物学检查

　　EBV分离培养困难 可用核酸杂交和PCR等方法检测细胞内EBV基因组及其表达产物 血清学诊断 EBV特异性抗体的检测 检测病毒VCA-IgA或EA-IgA抗 体，滴度≥1：5～1：10有诊断意义 异嗜性抗体凝集试验 用于传染性单核白细胞增多症的辅助诊断

　　四、防治原则

　　我国用基因工程方法构建的同时表达EBV gp320和HBsAg的疫苗，重点使用在鼻咽癌高发区。 gp320膜蛋白疫苗，正在英国大学生患者中作小规模接种，以期观察该疫苗是否能降低传染性单核细胞增多症的发病率。

　　第五节 其他

　　HHV-6——幼儿急疹( 6月~2岁，热退疹出) HHV-7——幼儿急疹(发病年龄略晚) HHV-8——与Kaposi肉瘤(KS)有关， 主要见于AIDS患者